临床流式免疫表型分析裂解红细胞的三种方法。先裂解后染色需谨慎

niwanmao · 发表于 2025-6-18 09:51:45

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临床流式处理样本，通常有三种方法，分别是Lyse-No Wash (LNW)、Bulk Lyse (LSW)和Tube Lyse (SLW)。大多数情况下，推荐SLW法。

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zdvfsadb · 发表于 2025-6-29 06:56:52

之前做流式的时候，感觉裂解液对小鼠红细胞的裂解效果也不好，都要好几轮，染色我一般放在裂解后，不知道是不是能解释样本中的细胞损失。

niwanmao · 发表于 2025-6-29 09:00:00

zdvfsadb 发表于 2025-6-29 06:56
之前做流式的时候，感觉裂解液对小鼠红细胞的裂解效果也不好，都要好几轮，染色我一般放在裂解后，不知道是 ...

在多次裂解过程中，必然会伴随多次离心操作。离心正是导致细胞丢失的关键因素。

Bruce_Shi · 发表于 2025-7-1 16:15:45

有个疑问：
先表染后裂红，染死活是在哪一步？上机前用7-AAD这种吗？
如果我要染胞内maker，顺序：死活——裂红——表染——perm——胞内染，这样表染又在裂红后了呀

niwanmao · 发表于 2025-7-1 20:28:21

Bruce_Shi 发表于 2025-7-1 16:15
有个疑问：
先表染后裂红，染死活是在哪一步？上机前用7-AAD这种吗？
如果我要染胞内maker，顺序：死活—— ...

第1个问题，先染后裂，染死活用7-AAD或PI这类非膜通透性的核酸染料，应在上机前染，并且不能固定。

第2个问题，你所说的顺序是可以的，先裂后染并非绝对不可以，只是在表型出现异常的时候，需要排除一下这个原因而已。

zdvfsadb · 发表于 2025-7-1 22:45:54

谢谢倪老师，学习了

Bruce_Shi · 发表于 2025-7-2 09:01:45

niwanmao 发表于 2025-7-1 20:28
第1个问题，先染后裂，染死活用7-AAD或PI这类非膜通透性的核酸染料，应在上机前染，并且不能固定。

第2 ...

理解了，谢谢

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