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[结构和原理] 增大荧光通道电压时,阴性和阳性群体是同步右移,还是阴性群体到了一定位置不会右移了

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发表于 昨天 07:38 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
请教下电压放大时对阴性和阳性群体是一样的放大倍数吗?只要阳性群不超过检测范围,阴性群可以无限制地往右移?
我发现在增大荧光通道电压时,阴性群虽然也会向右移,但是在0刻度会有一点细胞压线,排除补偿的问题,这是基线修复的问题了吗?

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发表于 昨天 08:28 | 显示全部楼层
会移的,峰形都会不同,所以会存在一个最佳电压
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发表于 昨天 09:53 | 显示全部楼层
在探测器的线性区间内,电压调大时对阴性和阳性群体的放大倍数是相同的(线性放大)。只是因为阴性本来的数值比较低,所以看起来数值放大的绝对值比较小。所以在直方图上看起来就是阳性移动的位置大,阴性移动的位置小。实际上倍率是一致的。
阴性群不可以无限制的右移,因为实际上探测器的输出并不是完全线性的,只是在一定范围内保持线性,超出范围的输出就会不太一样。所以需要根据预实验确定一个最佳电压。
在0处有压线,是荧光通道的阈值(也可以说是基线 baseline)导致的,设置荧光通道的阈值的目的是为了尽可能降低通道的MESF值,使仪器看起来性能非常好(比如FITC通道的MESF低于10之类的)。
如果是优化比较好的仪器,荧光通道是有一些负值的,压0 是粗暴的把低于阈值的数据统一归零了。
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