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CLL患者中，恶性克隆性CD19+ CD5+ B细胞在血液、骨髓和淋巴结异常增殖。除了白血病本身带来的负担，感染是CLL患者发病和死亡的主要原因之一。传统观点认为，CLL的免疫缺陷主要来自T细胞异常和抗体缺陷，但DC作为连接固有免疫和适应性免疫的核心“哨兵”，其状态却长期缺乏系统性研究。
树突状细胞根据表型和功能可分为常规树突状细胞（cDC）和浆细胞样树突状细胞（pDC）。cDC又包括交叉呈递能力最强的cDC1，以及功能多样的cDC2（CD5−和CD5+亚群）。此外，还有新近发现的Axl+Siglec-6+ DC（AS DC），它们在稳态下调节TLR信号和凋亡细胞的清除。
前期动物模型表明，Flt3/FL信号轴对DC的生成和稳态至关重要，而在人类中的作用尚未完全阐明。因此，Welch等人系统分析了87例未治疗CLL（UT-CLL）患者血液中6个功能不同的DC亚群及其骨髓前体，并结合Flt3/FL信号和临床预后指数（CLL-IPI），揭示DC缺陷与疾病预后的关系。
研究团队采用流式细胞术对外周血单个核细胞（PBMC）和骨髓单个核细胞（BM-MNC）进行设门。设门组合如下：
组合1 用于分析血液DC亚群，包括cDC1（CD11c+ CD123− CLEC9A+）、cDC2（CD1c+ CLEC9A−，进一步分为CD5−和CD5+）、pDC（CD11c− CD123+ CD303+）、AS DC（Axl+ Siglec-6+）；
组合2 用于检测cDC表面功能分子如XCR1（cDC1上），CLEC10A和CD11c（cDC2上）；
* 组合3 用于检测骨髓DC前体，包括GMDP（粒单核祖细胞）、MDP（单核-树突状祖细胞）、CDP（共同DC祖细胞）及pre-cDC（前体cDC）。
所有样本采用密度梯度离心分离，冷冻保存，实验前复苏，设门严格依照同批处理以减少批次效应，并使用异型对照确认设门的准确性。
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