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[结构和原理] 老生常谈,但很重要,H A W排除粘连体

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发表于 2025-10-9 00:58:44 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
一直都不太理解用 H A W排除粘连体的原理,

这个帖子一是英文,而视频好像也放不了。


什么是粘连体?如何排除粘连体?
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4333-1-1.html
(出处: 流式中文网)

想请各位老师,通俗易懂,分享一下去除粘连体的原理(去除的方法已会),我觉得非常重要。
非常感谢。

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发表于 2025-10-9 13:02:34 | 显示全部楼层
那个视频当初存在七牛存储上,结果这公司现在可能转型,把我们以前存的视频都删了

那么就文字回复吧


对于每一个事件,流式细胞仪的电子设备会测量FSC和SSC电压脉冲的三个关键特征。
1、高度(H):这是脉冲的最大电压。代表了散射光的峰值强度,这个强度发生在细胞正好处于激光束最中心的时候。
2、面积(A):这是电压脉冲在其整个持续时间内的积分。它代表了细胞完全通过激光束时所产生的散射光总量。
3、宽度(W):这是脉冲的持续时间,也就是细胞通过激光束所需的时间。

区分单细胞和多细胞(或细胞团)的关键在于,这三个参数(H、A和W)之间的关系是不同的。

对于单个细胞(Singlet):
一个单一的球形细胞会产生一个相对对称、尖锐的脉冲。对于一群大小不同的单细胞来说,脉冲的高度(Height)和面积(Area)之间存在很强的线性相关性。随着细胞变大,其散射的光线就更多(面积更高),峰值强度也更高(高度更高)。
因此FSC-A(前向散射面积)与FSC-H(前向散射高度)就存在很好的正比。


对于粘连体:
由两个或更多粘在一起的细胞组成的。当粘连体通过激光时,仍然会被记录为一个单一事件,但产生的脉冲形状有所不同,因为它们通过激光的时间比单个细胞更长,从而导致前述特征不成比例


但最后需要说明的是,有些特别大的细胞(例如巨噬、霍奇金淋巴瘤细胞等),可能因为脉冲强度过大,不在线性比例轴上,可能会被误认为粘连体,因此,在排除粘连体之前,一定要对自己的细胞有充分的认知
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 楼主| 发表于 2025-10-9 16:07:16 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2025-10-9 13:02
那个视频当初存在七牛存储上,结果这公司现在可能转型,把我们以前存的视频都删了

那么就文字回复吧

非常感谢倪老师,很清楚易懂。
我仅有一个问题,可能有点太认真了,如果两个细胞平行通过laser,那么W和单细胞是一样的,H和A是不是也成线性关系,所以无法去除这样的粘连体呢?
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发表于 2025-10-9 20:31:43 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2025-10-9 16:07
非常感谢倪老师,很清楚易懂。
我仅有一个问题,可能有点太认真了,如果两个细胞平行通过laser,那么W和 ...

粘连体就是指的两个细胞并排通过激光激发点
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 楼主| 发表于 2025-10-10 21:56:36 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2025-10-9 20:31
粘连体就是指的两个细胞并排通过激光激发点

上下黏在一起没有问题,可以判断出粘连体,但是平行通过激光,W这个参数就是与单个细胞是一样的,不能通过W来排粘连体吧。
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发表于 2025-10-11 11:11:40 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2025-10-9 16:07
非常感谢倪老师,很清楚易懂。
我仅有一个问题,可能有点太认真了,如果两个细胞平行通过laser,那么W和 ...

为什么并排平行通过H和A成线性
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发表于 2025-10-12 20:14:34 | 显示全部楼层
我是超人我怕啥 发表于 2025-10-11 11:11
为什么并排平行通过H和A成线性

并排通过是粘连体,不成线性
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发表于 2025-10-12 20:15:09 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2025-10-10 21:56
上下黏在一起没有问题,可以判断出粘连体,但是平行通过激光,W这个参数就是与单个细胞是一样的,不能通 ...

上下通过一个点,这是呈单细胞状态通过,不叫粘连
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发表于 2025-10-22 17:01:56 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2025-10-10 21:56
上下黏在一起没有问题,可以判断出粘连体,但是平行通过激光,W这个参数就是与单个细胞是一样的,不能通 ...

因为流体力学,一般长轴和液流方向平行
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