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[细胞增殖] Brdu-7AAD检测细胞增殖

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发表于 2014-4-9 15:55:42 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
各位大虾,最近看了一个BD的FITC BrdU Flow Kit,里面有一个这样的图它得到了如下结论,

Region Cell population
R3 G0/G1
R4 S phase
R5 G2 + M
R6 apoptotic


求指导,是怎么得到以上结论的

Brdu-7AAD.jpg
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 楼主| 发表于 2014-4-9 16:59:51 | 显示全部楼层
我在老师发的哺乳动物周期检测和分析视频里找到了答案,还有和我一样不明白的可以去看看
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发表于 2014-4-9 18:57:25 | 显示全部楼层
周利 发表于 2014-4-9 16:59
我在老师发的哺乳动物周期检测和分析视频里找到了答案,还有和我一样不明白的可以去看看 ...

横坐标7-AAD检测的是DNA含量,根据DNA含量区分三个期,然后BrdU是检测细胞增殖能力的,参与DNA合成,因为S期是DNA合成阶段,所以BrdU会掺入。
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 楼主| 发表于 2014-4-9 19:20:53 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2014-4-9 18:57
横坐标7-AAD检测的是DNA含量,根据DNA含量区分三个期,然后BrdU是检测细胞增殖能力的,因为S期是细胞增殖 ...

可是老师,在那个视频里,Brdu只有在S期掺入了,其他两个时相没有Brdu啊
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 楼主| 发表于 2014-4-9 19:40:48 | 显示全部楼层
QQ截图20140409193933.png QQ截图20140409193854.png
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发表于 2014-4-9 19:47:05 | 显示全部楼层
周利 发表于 2014-4-9 19:20
可是老师,在那个视频里,Brdu只有在S期掺入了,其他两个时相没有Brdu啊

嗯,是的,我前面没说清楚,现已改正,BrdU可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期)参与DNA合成的,而只有S期有DNA合成行为,故S期会表达。谢谢提醒。
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 楼主| 发表于 2014-4-9 21:00:55 | 显示全部楼层
老师,那这样的话,似乎Brdu没有起什么作用,因为它的结果就是PI直方图周期拟合后S期的百分比啊,和周期结果无异,那为什么还要用它呢?
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发表于 2014-4-28 13:53:00 来自手机 | 显示全部楼层
周利 发表于 2014-4-9 21:00:55
老师,那这样的话,似乎Brdu没有起什么作用,因为它的结果就是PI直方图周期拟合后S期的百分比啊,和周期结果无异,那为什么还要用它呢?...

R4门反应了掺入BrdU后进入S期的细胞比例,与S并不完全相同。通过对照实验,BrdU才是反应细胞增殖数度的数据。而单纯的S期比例不能直接反应增殖速率的,他单纯就是个比例。BrdU掺入实验一定要注意检测时间,对于永生化的细胞一定不能超过一个细胞周期,否则BrdU在细胞内的累积会越来越多,就算是细胞回到G0/G1期也会是BrdU阳性的。

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