流式细胞术定量检测支原体红细胞吸附活性

niwanmao

一些粘附性支原体可形成高度复杂的极化结构，在感染第一阶段通过促进宿主细胞粘附而发挥毒性作用。
一般情况下，支原体细胞的粘附活性是通过直接观察其与红细胞吸附能力进行检测的，尽管这些方法可定性而且直接的观察到红细胞吸附或凝血作用，但都非常昂贵或很难重复。
通过流式细胞术，作者开发出一种快速而准确地定量支原体红细胞吸附能力的方法，简言之，就是利用染细胞核的活性染料SYBR Green I，通过荧光强度不同、大小不同区分出红细胞和支原体细胞。
该方法重复性非常高，并可绘制出数据的动力学曲线，进行准确的红细胞吸附定量，从而能够提供更有价值的微生物毒力数据。

详细步骤请参见全文地址：http://www.plosone.org/article/i ... ournal.pone.0087500


图1、横坐标代表SYBR Green I，纵坐标代表SSC，门R1代表游离的支原体，R2代表红细胞


图2、R1代表游离支原体，但其中会混有一些非特异性信号（A图的粗箭头），所以需要通过B图的FL3/FL1散点图圈R3，确定真正的游离支原体（C图的MR），而C图的粗箭头指的就是与红细胞粘附的支原体。