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楼主: niwanmao

流式细胞术疑难解答(二):背景荧光(非特异性染色)高

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发表于 2021-7-8 10:09:13 | 显示全部楼层
倪老师,像我下图这种可以分出两群的细胞,能考虑非特异性么?我染的是一个荧光DNA探针,传统观点认为我的探针应该不在这个细胞群中表达
流式图.png
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发表于 2021-7-8 10:09:45 | 显示全部楼层
lxk47640 发表于 2021-7-8 10:09
倪老师,像我下图这种可以分出两群的细胞,能考虑非特异性么?我染的是一个荧光DNA探针,传统观点认为我的 ...

Q4部分是否考虑非特异性染色?
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发表于 2021-7-8 10:44:45 | 显示全部楼层
受益匪浅,谢谢老师
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发表于 2022-3-4 17:49:59 | 显示全部楼层
倪老师,如果做的是流式的间标染色,细胞管没有阳性,说明细胞没有自发荧光,但是加了PE荧光的二抗,也圈的是活细胞,没有加一抗,此时出现了60%左右的阳性。这个您感觉可能是什么原因?
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发表于 2022-3-4 18:02:49 | 显示全部楼层
本帖最后由 wmj123456 于 2022-3-4 18:06 编辑

倪老师,您好,我是做的流式的间标染色,直接加的细胞是没有阳性的,但是只加了PE荧光二抗后,没有加一抗,也圈出的是活细胞,阳性比例达到了50%,请问可能是什么原因?

空白管.png
单染管.png
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 楼主| 发表于 2023-8-2 21:59:35 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2022-3-4 18:02
倪老师,您好,我是做的流式的间标染色,直接加的细胞是没有阳性的,但是只加了PE荧光二抗后,没有加一抗, ...

可能是细胞活力差,导致的非特异性粘附
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