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[标本处理] 肿瘤浸润T淋巴细胞TIL的分离

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发表于 2015-6-14 17:01:02 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
有没有谁做过从小鼠肿瘤组织中分离TIL,有没有比较成熟的protocol,我是想分离之后培养几天做胞内因子染色分析IFN-g分泌的情况,但是做了好多次都分不到比较纯的淋巴细胞,而且大部分都还是肿瘤细胞,想问问分离完了还需不需要再用分选试剂盒把细胞分出来?!我现在的方法是:取出肿瘤组织,将其剪碎用胶原酶四和DNA酶消化30min,用60%(老师说应该70%?)和40%的percoll分离,分离后的细胞从大小上就看出来还是肿瘤细胞占多数,也尝试过用淋巴细胞分离液的方法,也分不出来。麻烦老师帮忙指点一下!



淋巴细胞分离液分离

淋巴细胞分离液分离

percoll分离上层细胞

percoll分离上层细胞
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发表于 2015-6-14 21:44:18 | 显示全部楼层
Ficoll和Percoll都是分离单个核细胞,不能特异性分离不同种类的细胞,你要分出纯淋巴细胞,还是需要用分选,磁珠分选或流式分选均可。
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 楼主| 发表于 2015-6-15 13:55:15 来自手机 | 显示全部楼层

好的,谢谢倪老师
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