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楼主: 王娟

[淋巴细胞相关] 鼠脾淋巴细胞CD4CD25染色流式分析结果

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发表于 2015-8-28 14:36:45 | 显示全部楼层
本帖最后由 小憨 于 2015-8-28 15:02 编辑
王娟 发表于 2015-8-28 09:20
那能不能问问您,一般分选出来的细胞在几孔板中培养呢?种多少细胞呢?我觉得会不会细胞数量多少也会影响 ...

会有影响,我一般种1~4×10^6个细胞每孔(24孔板)。尤其是CD3和28抗体刺激的时候,因为抗体是包被在板底的,如果细胞太密堆叠的话,接触不到板底的细胞就不能充分活化了,但细胞密可以增加细胞的存活率。这是我的经验。
另,我没做过conA的,我从丁香园上查到各帖子,希望对你有帮助。
http://www.dxy.cn/bbs/topic/23453833
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 楼主| 发表于 2015-8-28 16:30:16 | 显示全部楼层
小憨 发表于 2015-8-28 14:36
会有影响,我一般种1~4×10^6个细胞每孔(24孔板)。尤其是CD3和28抗体刺激的时候,因为抗体是包被在板底 ...

非常感谢您的热心帮助,
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发表于 2015-8-29 15:39:24 | 显示全部楼层
王娟 发表于 2015-8-28 16:30
非常感谢您的热心帮助,

不客气,希望实验顺利
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 楼主| 发表于 2015-9-18 14:14:54 | 显示全部楼层
小憨 发表于 2015-8-28 14:36
会有影响,我一般种1~4×10^6个细胞每孔(24孔板)。尤其是CD3和28抗体刺激的时候,因为抗体是包被在板底 ...

我还想问问您,刺激鼠淋巴细胞CD3CD28包被的板,您用的是哪一家的,效果好吗?
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发表于 2015-9-18 14:55:56 | 显示全部楼层
王娟 发表于 2015-9-18 14:14
我还想问问您,刺激鼠淋巴细胞CD3CD28包被的板,您用的是哪一家的,效果好吗? ...

我用的是美天旎的,效果还不错。不过我觉得品牌影响不大。
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 楼主| 发表于 2015-9-21 12:30:45 | 显示全部楼层
小憨 发表于 2015-9-18 14:55
我用的是美天旎的,效果还不错。不过我觉得品牌影响不大。

您好,又来麻烦你了,能不能麻烦您告知下美天旎CD3,CD28的货号,另这些买来的抗体要自己包被吗?还是包被好的,自己包被的话,能不能告诉我一下包被的方法?我看了很多帖子,各种说法不一,所以不知道具体该怎么包被?
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发表于 2015-9-21 20:16:29 | 显示全部楼层
王娟 发表于 2015-9-21 12:30
您好,又来麻烦你了,能不能麻烦您告知下美天旎CD3,CD28的货号,另这些买来的抗体要自己包被吗?还是包 ...

这个应该可以回答你的所有问题


体外扩增人PBMC中的T细胞(anti-CD3   CD28):
https://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=ODc5MXxmOTliNWVmZHwxNzQ3MTM0Mjk1fDB8

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