细胞周期疑问及结果分析

cl小陈 · 发表于 2016-6-13 18:06:13

疑问：我看有的资料说，检测细胞周期时，1.需要同步化细胞（饥饿法），2.诱导细胞后处理时，细胞培养基和清洗的PBS都还要收集一并离心；搭大家操作时怎么处理的？

结果分析：
我做了一次细胞周期，按照南京建成的细胞周期测定使用说明（南京建成的试剂盒），结果不知道怎么分析的，因为是用别的实验室的流式细胞仪（密理博Guava easyCyte），那边博士帮忙操作的，他也不会处理了数据，，，，大神可以帮忙看下，看看有什么问题吗？

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niwanmao · 发表于 2016-6-14 13:47:05

需要看你的目的，如果你只是单纯检测某种药物作用后细胞周期的自然变化，建议直接收标本检测，不需要同步化。同步化细胞周期，说白了，是为了获得比较均一的细胞进行测试，人为的因素太明显，参见下面的PDF：
http://www-personal.umich.edu/~cooper/Cell.pdf

燕仔zoe · 发表于 2016-6-20 09:50:42

如果你只是检测细胞周期内的各参数的比值，G1期G2期S期，那只要分析主细胞群就好，就算你把上清和洗的PBS都收集了，在FSC/SSC的图中，应该也是和主细胞群不在一个位置，圈门只圈主细胞群。
如果你是还要看凋亡等等，那就要收上清和PBS，在ModFit拟合里面有SubG峰的拟合，推算apoptosis。
但是个人觉得周期检测本身是为了分析周期，而且在Modfit里面拟合apoptosis结果并不是很完美，有时候分析人员的个人因素会差好多。至于凋亡，本身有更专业的检测试剂盒AnnexinV可以检测，何必非要用周期的试剂去做呢。

cl小陈 · 发表于 2016-6-21 14:28:30

燕仔zoe 发表于 2016-6-20 09:50
如果你只是检测细胞周期内的各参数的比值，G1期G2期S期，那只要分析主细胞群就好，就算你把上清和洗的PBS都 ...

多谢，我也在用Annexin V-FITC检测凋亡，这个只是检测周期

cl小陈 · 发表于 2016-6-21 14:29:36

燕仔zoe 发表于 2016-6-20 09:50
如果你只是检测细胞周期内的各参数的比值，G1期G2期S期，那只要分析主细胞群就好，就算你把上清和洗的PBS都 ...

多谢，我也在用Annexin V-FITC检测凋亡，这个只是检测周期

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