紧贴X轴底部的细胞是否该划入圈内

luyexianzong

如图1， 图2 所示。
请教倪老师，各位，不知图2靠近X轴最底部的细胞是否该划入圈内， 怎样避免细胞紧贴X轴底部？

niwanmao

你这个方案一共标记了哪些抗体？Hoechst坐标可以用Logicle转换显示出来。

luyexianzong

只有Hoechst 33258 和CFSE

luyexianzong

Hoechst 染色后立即检测了，从添加Hoechst 到检测不超过10分钟。可否认为部分的活细胞没有染上Hoechst，导致值很低？

luyexianzong

另外一个问题， CFSE染色的细胞死亡后，被其他白细胞吞噬，会再次染色该吞噬细胞吗？

niwanmao

luyexianzong 发表于 2018-11-12 14:24
Hoechst 染色后立即检测了，从添加Hoechst 到检测不超过10分钟。可否认为部分的活细胞没有染上Hoechst，导 ...

按照说明书，不同的细胞类型对应的条件如下：
Bacteria， 0.1 to 12 µg/mL， 10 to 30 minutes
Live animal cells， 0.2 to 5 µg/mL， 20 to 30 minutes
Fixed animal cells ，0.2 to 2 µg/mL ，1 to 15 minutes

至于CSFE染色的细胞如果被吞噬了，那么吞噬的细胞会有荧光发出。

luyexianzong

Live animal cells， 0.2 to 5 µg/mL， 20 to 30 minutes.  我参考的是这个浓度。若短时间的话，小于20min，是否可以认为活细胞不被染色？