0.22μm滤膜过滤问题与流式清洗

1249471827a

各位老师好，最近实验室的流式细胞仪很脏，论坛的帖子都学习了一遍，但对流式的清洁效果依然不大。请各位老师给提提建议。

背景：BD FACS Canto仪器3激光十色，最近用清洗液（BD原厂FACS clean）冲洗时，上样速度选择高速（high），evt/s在120-180左右；散点图上也非常多点；FITC直方图、APC直方图、BV450直方图都有荧光强度（全部采用对数放大），分别小于10的1、10的2、10的2强度；电压与以往清洗仪器时相同，但以往散点图上非常干净。询问工程师后说，做样本时可以用水替代鞘液，然后就用0.22μm滤膜过滤后用于清洗流式。过滤水用的是真空抽滤装置。

疑惑：0.22μm过滤时，不施加压力，液体依靠自身的压强就会自己透过滤膜吗？这会不会是滤膜没放好或者是装置漏气导致的？
像我们实验室流式细胞仪的这种情况是只能选择继续清洗吗？

liliness

流式脏的时候，我们会先用次氯酸进行清洗，之后再用水清洗。

niwanmao

0.22um需要加压过滤的。

像你们说的这种情况，也不排除流动室脏，这个清洗很麻烦，需要用特殊手段冲洗，大多情况下需请工程师帮忙。

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niwanmao 发表于 2018-11-22 09:06
0.22um需要加压过滤的。

像你们说的这种情况，也不排除流动室脏，这个清洗很麻烦，需要用特殊手段冲洗，大 ...

谢谢倪老师。您的意思可以理解成0.22μm不加压水是不会自动透过的，对吗？

我们就是不加压水会自己透过滤膜滴下去，我就觉得不对劲。

niwanmao

1249471827a 发表于 2018-11-22 09:54
谢谢倪老师。您的意思可以理解成0.22μm不加压水是不会自动透过的，对吗？

我们就是不加压水会自己透过 ...

不知道你是怎么做的，纯水浸润滤膜后，无论滤膜孔多小，都是可以浸湿后滴下去的，除非孔径比水分子小。此外，滤膜边上的缝隙也要注意一下。

1249471827a

niwanmao 发表于 2018-11-22 10:58
不知道你是怎么做的，纯水浸润滤膜后，无论滤膜孔多小，都是可以浸湿后滴下去的，除非孔径比水分子小。此 ...

懂了，谢谢倪老师

1249471827a

补个后续，没有好办法只能用笨办法了。先清洗流动室，再用clean洗5分钟，再用水洗5分钟，以这种方式连续洗了3次，有改善，清洗前CST不能通过的，现在可以通过了，就是CV比较大，考虑继续清洗。
ps：各位老师，如果你们的BD流式是没有购买每年的维修保养的话（10+万/年），从今年10月份开始工程师上门要收费啦

niwanmao

1249471827a 发表于 2018-11-26 13:13
补个后续，没有好办法只能用笨办法了。先清洗流动室，再用clean洗5分钟，再用水洗5分钟，以这种方式连续洗 ...

工程师上门收费好几年前就开始了吧。维保是挺贵的。

1249471827a

niwanmao 发表于 2018-11-26 16:43
工程师上门收费好几年前就开始了吧。维保是挺贵的。

哦哦，可能不同地方不太一样？坐标哈尔滨，10月份工程师来了时候收费了，说我们运气不好，上个月刚说要收费