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楼主: 小江

[标本处理] 流式测得的细胞都在坐标轴上怎么破?求大家讲解怎么补...

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发表于 2018-12-27 18:03:36 来自手机 | 显示全部楼层
荧光标记的AV是一种蛋白,结合细胞后,阴性背景荧光会增大很多,所以不能以裸细胞来调机器!通常要用单染AV的样本来确定双阴性位置!图中细胞群整个偏右了,况且用Calibur模拟机做的数据,结果没办法补救了!
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发表于 2018-12-27 18:03:56 来自手机 | 显示全部楼层
本帖最后由 ddn111 于 2018-12-27 18:07 编辑

第一次用手机回复,显示出来就发了两次!
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发表于 2018-12-28 08:15:54 | 显示全部楼层
小江 发表于 2018-12-27 16:26
谢谢倪老师的回复~
  那超出上限的信号有什么方法可以让它显示出来吗?我用flowjo把横纵坐标调大了之后, ...

不要紧的。
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发表于 2018-12-28 08:36:31 来自手机 | 显示全部楼层
首先,信号是收集了的,比例什么的都没有问题。你的空白对照最好也要用刺激过后的细胞来调节下电压。只是图不好看而已啦,下次实验可以考虑把FITC和PE通道电压调小些就好了,使得所有信号都能被收集显示就好了
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发表于 2018-12-29 15:37:45 | 显示全部楼层
小江 发表于 2018-12-27 16:59
老师您也遇到了这种问题吗?您最后是怎么处理的?那些超出上限的信号可以调出来吗? ...

首先我们一直是尽量不发生这种情况,可以在上机前用样本试一下,统一调好电压。如果已经出现这样,就把那一块都圈上。现在倪老师提出信号不是被切掉,而是默认为最大值,那就更好了。比例影响也不大。
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