请老师帮分析一下流式数据处理

zhangyuwei

niwanmao

1、你的机器是什么？为什么FSC和SSC出不来。
2、DAPI紫外激发，是否选择了正确的通道？我看你标记里面写着PB450，如果是PB的话，那是紫光，而不是紫外。
3、数据结果没看到明显的周期。

zhangyuwei

niwanmao 发表于 2019-3-2 15:37
1、你的机器是什么？为什么FSC和SSC出不来。
2、DAPI紫外激发，是否选择了正确的通道？我看你标记里面写着P ...

老师您好，我用的机子贝克曼库尔特的CytoFLEX，我是按着应用手册操作的，不知道哪里出了问题。

niwanmao

zhangyuwei 发表于 2019-3-4 11:23
老师您好，我用的机子贝克曼库尔特的CytoFLEX，我是按着应用手册操作的，不知道哪里出了问题。 ...

1、细胞是否已被处理碎，导致FSC和SSC出不来？不知道你的样本类型是什么？
2、DAPI的激发波长应该是358nm，所以资料里面的PB通道检测是有问题的。

zhangyuwei

niwanmao 发表于 2019-3-4 19:48
1、细胞是否已被处理碎，导致FSC和SSC出不来？不知道你的样本类型是什么？
2、DAPI的激发波长应该是358nm ...

老师好，样品直接是用的NIM-DAPI处理的，并没有用机械破碎。这个样品是昆虫的组织。

niwanmao

zhangyuwei 发表于 2019-3-6 11:30
老师好，样品直接是用的NIM-DAPI处理的，并没有用机械破碎。这个样品是昆虫的组织。 ...

NIM是破膜成份，DAPI是染料，我的意思是否被NIM破碎了。没说你用机械磨。

robert1988

niwanmao 发表于 2019-3-6 15:15
NIM是破膜成份，DAPI是染料，我的意思是否被NIM破碎了。没说你用机械磨。

DAPI是可以用405nm 激发的，就是信号弱了点，不是不能用。