为什么跑流式的时候细胞会分群

yangjf

大家好，这我先前做的一组流式，使用的细胞是Hela细胞，当时做了两批，一批（7.2）是跑流式前一天做的，没有超过24小时，从24孔板中消化，加了少量培养基终止消化，又添了一半PBS吹打，收集细胞离心，细胞沉淀在管底，PBS重悬后，置于冰箱保存；另一批（7.3）是跑流式当天做的，去掉胰酶，直接加的PBS吹打，收集细胞离心，细胞不沉淀在管底而是聚集成絮状飘在离心管里；两批跑完的结果如下，想问下为甚么第一批在跑流式的时候会出现分群？

niwanmao

7月3日当天处理的明显样本活性更好。
7月2日的样本，未进行任何保护措施，所以细胞大部分发生细胞膨胀死亡，活力不好。

yangjf

niwanmao 发表于 2019-7-5 11:27
7月3日当天处理的明显样本活性更好。
7月2日的样本，未进行任何保护措施，所以细胞大部分发生细胞膨胀死亡 ...

嗯明白了。那老师有没有什么方法保存细胞呢？因为有时候第二天来不及处理，需要提前收集细胞。

niwanmao

yangjf 发表于 2019-7-5 14:20
嗯明白了。那老师有没有什么方法保存细胞呢？因为有时候第二天来不及处理，需要提前收集细胞。 ...

两种方法：
1、用多聚甲醛固定，但有毒性，可能对抗原表达影响较大。
2、如果预算充足，可用我们的流式专用保存液，无毒，对抗原表达强度相对影响较小：https://detail.youzan.com/show/g ... 0&spm=f46216002

yangjf

niwanmao 发表于 2019-7-6 10:04
两种方法：
1、用多聚甲醛固定，但有毒性，可能对抗原表达影响较大。
2、如果预算充足，可用我们的流式专 ...

谢谢老师解答！