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[干细胞相关] 间充质干细胞阴性表型弱阳性问题

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发表于 2020-9-17 10:51:30 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
请教各位老师,无血清培养基培养的P3-P5脐带MSC消化后直接做流式,部分样本CD34出现大于2%的(2-4左右),也有部分样本CD45出现大于2%的(2-4左右)

使用剩余未染色的细胞复测后,就全部正常了,复测比第一次上机晚大约1-1.5小时,抗体是BD的,这种情况有可能是什么原因?

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发表于 2020-9-17 14:59:30 | 显示全部楼层
这点阳性,极有可能是一些非特异性染色。关键还是在洗涤上。多洗涤几次,就能稳定了。
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 楼主| 发表于 2020-9-17 20:28:40 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-9-17 14:59
这点阳性,极有可能是一些非特异性染色。关键还是在洗涤上。多洗涤几次,就能稳定了。 ...

老师您好,实验室按照标准流程操作的,孵育后PBS洗两次然后上机,复测的标记后也是洗两次,也就是样本4度放置1.5-2小时后再标记抗体的通常都不会偏高了,真是有点奇怪
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发表于 2023-8-16 11:14:44 | 显示全部楼层
你这个问题我也遇到过,脐带MSC现在遇到CD45不合格的问题,柱状图经常拖尾。试着调低一点离心速度看看结果怎么样
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