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[标本处理] Th细胞这样设置实验可以吗?

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发表于 2020-9-28 21:26:59 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
马上检测Th1, Th2, Th17细胞了,实验可以这样设吗:


一  收集数据的时候可以做这样的设置吗?
1. Th1 细胞:
unstained PBMC;   PerCP-Cy™5.5-CD4 stained PBMC;  FITC-IFN-γstained PBMC;
PerCP-Cy™5.5-CD4 and FITC-IFN-γstained PBMC;

2. Th17细胞:
unstained PBMC;   PerCP-Cy™5.5-CD4 stained PBMC;  PE-IL-17A stained PBMC;
PerCP-Cy™5.5-CD4 and PE-IL-17A  stained PBMC;

3. Treg细胞:
unstained PBMC;   PerCP-Cy™5.5-CD4 stained PBMC;  PE-CD25 stained PBMC;  FITC-CD127 PBMC;
PerCP-Cy™5.5 CD4 and PE-CD25 stained PBMC;  PerCP-Cy™5.5-CD4 and FITC-CD127 PBMC;
PE-CD25 and FITC-CD127 PBMC;
PerCP-Cy™5.5-CD4 + PE-CD25 + FITC-CD127 stained PBMC;

二  PMA 50 ng/mL+Ionomycin 1 μg/mL + 5 µg/ml BFA刺激PBMC的时间是多少?4个小时够吗?

三 当PBMC刺激结束后,细胞表面染色,固定,穿孔,细胞内染色后,可以保存在4度过夜,第二天再收集数据吗?
如果是这样,细胞用什么保存呢?是用PBS还是细胞破膜液保存细胞过夜?

非常感谢。




流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2020-11-1 22:01:49 来自手机 | 显示全部楼层
一、二可以
三还是建议收集细胞马上做,不建议第二天做。
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