找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

查看: 788|回复: 8

[标本处理] 小鼠T细胞活化后流式检测相关问题

[复制链接]
发表于 2021-12-6 10:02:39 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏3流星未解决
小鼠T细胞用CD3/CD28抗体活化后流式检测GPF的强度,发现随着培养时间的延长(两次检测相隔4天)细胞GPF的强度有所增强,请问这是什么原因

流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2021-12-6 11:03:05 | 显示全部楼层
活化后,FSC和SSC是否也都有所增大?如是,则可能活化后的非特异性荧光导致的增强。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2021-12-22 22:17:55 | 显示全部楼层
是的,FSC和SSC都有所增大。倪老师,我是想通过GFP检测病毒转导T细胞的效果,如果未转导病毒的T细胞非特异性荧光很高那么背景就会很高,相应的转导过病毒的T细胞检测到的阳性率就会偏低,请问有什么方法可以纠正吗?
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2021-12-23 07:47:32 | 显示全部楼层
wgz2414 发表于 2021-12-22 22:17
是的,FSC和SSC都有所增大。倪老师,我是想通过GFP检测病毒转导T细胞的效果,如果未转导病毒的T细胞非特异 ...

「未转导病毒的T细胞」有无转染过空载质粒?
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2021-12-23 10:54:53 | 显示全部楼层
没有转染过
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2021-12-23 11:07:07 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-12-23 07:47
「未转导病毒的T细胞」有无转染过空载质粒?

没有转染过空载,这个T细胞只进行过活化没有做过其他任何处理
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2021-12-23 13:43:55 | 显示全部楼层
wgz2414 发表于 2021-12-23 11:07
没有转染过空载,这个T细胞只进行过活化没有做过其他任何处理

需要用空载质粒的。严格的对照,要使得其它因素都一致,仅留一种因素不同。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2021-12-23 16:48:00 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-12-23 13:43
需要用空载质粒的。严格的对照,要使得其它因素都一致,仅留一种因素不同。 ...

倪老师,我们的空载也是带GFP的,所以我们都是用Blank-T细胞作对照检测阳性率。现在问题是Blank-T细胞培养久了之后会有非特异性的荧光出来,干扰了阳性率的检测
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2021-12-23 21:10:27 | 显示全部楼层
wgz2414 发表于 2021-12-23 16:48
倪老师,我们的空载也是带GFP的,所以我们都是用Blank-T细胞作对照检测阳性率。现在问题是Blank-T细胞培 ...

空载,需要那些不带荧光标记蛋白的。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2024-11-1 07:35

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2024 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表