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[淋巴细胞亚群] TREG分析圈门的问题

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发表于 2022-4-1 14:18:08 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
本帖最后由 archerliang 于 2022-4-1 14:20 编辑

各位老师,我有一个疑惑,在TREG数据分析时,如果只有一群细胞,我怎么确定门的位置呢(右上角的图片),必须做同型对照进行对比设门吗?
微信截图_20220401141740.png

最佳答案

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这个在你设计多色方案的时候就要考虑了 低表达的maker要选用荧光强度较高的荧光素,门的位置建议通路有富裕的话还是至少染一下CD45 CD3 CD4 CD8之类的 这样将CD4 T细胞圈出来,CD127 FOXP3通过FMO来圈门即可
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发表于 2022-4-1 14:18:09 | 显示全部楼层
archerliang 发表于 2022-4-2 11:41
倪老师,FMO设门会不会对一些低表达抗体或者荧光强度低的荧光实际表达率有影响? ...

这个在你设计多色方案的时候就要考虑了 低表达的maker要选用荧光强度较高的荧光素,门的位置建议通路有富裕的话还是至少染一下CD45 CD3 CD4 CD8之类的 这样将CD4 T细胞圈出来,CD127 FOXP3通过FMO来圈门即可
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发表于 2022-4-1 18:24:17 | 显示全部楼层
多色方案,则用Fc阻断之后的FMO对照设门。
单色,可能Fc阻断后的同型对照。
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 楼主| 发表于 2022-4-2 11:41:06 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2022-4-1 18:24
多色方案,则用Fc阻断之后的FMO对照设门。
单色,可能Fc阻断后的同型对照。 ...

倪老师,FMO设门会不会对一些低表达抗体或者荧光强度低的荧光实际表达率有影响?
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发表于 2022-4-14 09:15:35 | 显示全部楼层
老师,如果是CD4+CD25+CD127-的marker来圈treg,是不是就没法用FMO来做对照,那样怎么做会比较好
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发表于 2022-4-14 21:30:02 | 显示全部楼层
无知的牧羊人 发表于 2022-4-14 09:15
老师,如果是CD4+CD25+CD127-的marker来圈treg,是不是就没法用FMO来做对照,那样怎么做会比较好
...

Treg分群还是很好的,通过25和127散点图,很容易分,不用FMO
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