请教：关于CD11b和F4/80检测小鼠巨噬细胞

mybiosciences

附图是BD网站上F4/80说明书里的一张图片，右图CD11b和F4/80双染，F4/80阳性细胞有两群，请问，这两群都是巨噬细胞吗？
以下是图片的说明Two-color flow cytometric analysis of F4/80 expression on mouse splenocytes. C57BL/6 mouse splenic leucocytes were preincubated with Purified Rat Anti-Mouse CD16/CD32 antibody (Mouse BD Fc Block™) (Cat. No. 553141/553142) and stained with PE Rat Anti-Mouse CD11b antibody (Cat. No. 553311/557397/561689) and either Alexa Fluor® 647 Rat IgG2a Isotype Control (Cat. No. 557690; Left Plot) or Alexa Fluor 647 Rat Anti-Mouse F4/80 antibody (Cat. No. 565853/565854; Right Plot). The two-color flow cytometric dot plot showing the correlated expression of F4/80 (or Ig Isotype control staining) versus CD11b was derived from gated events with the forward and side light-scatter characteristics of viable monocytes. Flow cytometric analyses were performed using a BD LSRFortessa™ Cell Analyzer System.

niwanmao

两群都是。

具体细分参见下图：


来源：https://iai.asm.org/content/76/12/5843/figures-only

多纳泰罗豪

niwanmao 发表于 2020-3-30 12:24
两群都是。

具体细分参见下图：

老师您好，AM肺泡巨噬细胞和M1 M2 有什么关联吗？ 我分析肺巨噬细胞，做intra 该圈那一个

毛豆24821

我之前也跟大佬请教过类似问题，你可以参考。
F4/80在不同组织里面的定义不太一样，肿瘤脾脏里面mono的表达量不尽相同。在小鼠的很多肿瘤模型的肿瘤组织里面，我更倾向于F4/80++CD11b+是macrophage，F4/80dimCD11b+是MDSC或者monocytes。

niwanmao

毛豆24821 发表于 2020-7-16 20:24
我之前也跟大佬请教过类似问题，你可以参考。
F4/80在不同组织里面的定义不太一样，肿瘤脾脏里面mono的表达 ...

你说的对。对照2楼这张图应该是最强的那群是巨噬，中间这群弱表达的包括了单核和DC

YC5125

老师我想问一下，如果染F40/80和CD206双色的话，是先染表面的F40/80，然后再破膜固定，再染胞内的CD206吗？

niwanmao

YC5125 发表于 2022-3-14 20:19
老师我想问一下，如果染F40/80和CD206双色的话，是先染表面的F40/80，然后再破膜固定，再染胞内的CD206吗？ ...

是的

bailiping

YC5125 发表于 2022-3-14 20:19
老师我想问一下，如果染F40/80和CD206双色的话，是先染表面的F40/80，然后再破膜固定，再染胞内的CD206吗？ ...

您好，我想问一下您是用什么作为破膜剂和固定剂的，以及破膜和固定的时间是多久呢

niwanmao

bailiping 发表于 2022-8-1 21:10
您好，我想问一下您是用什么作为破膜剂和固定剂的，以及破膜和固定的时间是多久呢
...

市场上那些商品化的固定破膜剂都可以。

bailiping

niwanmao 发表于 2022-8-1 21:30
市场上那些商品化的固定破膜剂都可以。

我在做预实验的时候，没有固定，直接用1毫升0.2% Triton-X100，破膜10 min 没有收到细胞，是我破膜剂的浓度和时间不合适吗?