求大神告知流式鉴定植物倍性出现此结果可能的原因

cxy

实验步骤：
1. 将洗净的嫩叶在预冷的培养皿（加入2ml解离液）中切碎
2. 20min后过滤到2ml离心管中
3. 4℃，3000r/min，5min，弃上清    （有绿色沉淀产生）
4. 加入500ul PBS 缓冲液，冲洗一次，4℃，3000r/min，5min，弃上清
5. 加入150ul解离液，混匀
6. 5min后加入100ul PI染色液（50ug/ml PI +0.5mg/ml RNA酶）,30min后上机检测。
通道为Percp通道
请问：出现该结果的原因是未解离出细胞核还是其他问题？
请各位多多指点

cxy

从图上看
未染色样品和染色样品没有很大差异
加标参和不加标参没有很大差异
请问这是因为细胞核未解离成功吗？

niwanmao

1、检测通道请改为LIN模式。
2、其它通道表现如何？

cxy

这是加入标参后PE通道的结果

niwanmao

cxy 发表于 2021-1-17 08:52
这是加入标参后PE通道的结果

PE或PerCP通道分别改为LIN模式显示看看。

cxy

Percp通道
LIN模式

cxy

PE通道
LIN模式

niwanmao

cxy 发表于 2021-1-18 20:24
Percp通道
LIN模式

LIN模式下，把主群坐标做一下缩放调整，让主群显示在靠中间一些，便于观察峰的分布。

cxy

老师你好，我又重新做了以下，您看这种情况是细胞核没有被解离出来，还是其他什么原因呢？

niwanmao

cxy 发表于 2021-1-21 19:26
老师你好，我又重新做了以下，您看这种情况是细胞核没有被解离出来，还是其他什么原因呢？
...

不是这样看的，PI-A和PI-H形成一个散点图看。