肌细胞细胞周期

heybibna · 发表于 2021-3-4 09:50:23

我是做绵羊的肌肉细胞周期，用的是碧云天的盒子PI染色法做的，但是做出来结果没有分群，不知道哪个是细胞碎片哪些是染色的细胞，想问问有什么解决办法吗？

niwanmao · 发表于 2021-3-4 14:34:28

E1门再往左移，看看第2个图上变成什么样的？

heybibna · 发表于 2021-3-4 15:41:22

本帖最后由 heybibna 于 2021-3-4 15:42 编辑

niwanmao 发表于 2021-3-4 14:34
E1门再往左移，看看第2个图上变成什么样的？

往左移的话不是细胞碎片吗？圈出来就是这样，怎么都感觉圈的不是目的细胞D:\流式周期图2.jpg

tiger · 发表于 2021-3-4 16:48:11

heybibna 发表于 2021-3-4 15:41
往左移的话不是细胞碎片吗？圈出来就是这样，怎么都感觉圈的不是目的细胞 ...

把FCS文件传上来

niwanmao · 发表于 2021-3-4 19:55:35

heybibna 发表于 2021-3-4 15:41
往左移的话不是细胞碎片吗？圈出来就是这样，怎么都感觉圈的不是目的细胞 ...

前面那个E2门不要动，只移动E1，看看E2里面的信号还有没有。如果没有了，就说明左边全是碎片，就不要圈了。

heybibna · 发表于 2021-3-4 20:18:36

tiger 发表于 2021-3-4 16:48
把FCS文件传上来

传不上去

heybibna · 发表于 2021-3-4 20:28:24

niwanmao 发表于 2021-3-4 19:55
前面那个E2门不要动，只移动E1，看看E2里面的信号还有没有。如果没有了，就说明左边全是碎片，就不要圈 ...

我是用Ⅰ型胶原酶消化肌肉组织，之后过筛用酒精固定过夜，第二天染色上机，但是做了几次预实验上机结果都是细胞无法分群，您看操作哪里有问题吗？

tiger · 发表于 2021-3-5 09:46:09

heybibna 发表于 2021-3-4 20:28
我是用Ⅰ型胶原酶消化肌肉组织，之后过筛用酒精固定过夜，第二天染色上机，但是做了几次预实验上机结果都 ...

E1可不圈，只圈E2，但要尽可能的去除粘连细胞。不知你做肌细胞的细胞周期的实验目的是什么，理论上肌细胞是不分裂的。

heybibna · 发表于 2021-3-5 10:24:17

tiger 发表于 2021-3-5 09:46
E1可不圈，只圈E2，但要尽可能的去除粘连细胞。不知你做肌细胞的细胞周期的实验目的是什么，理论上肌细胞 ...

怎么去除粘连细胞呢，我的试验经过特殊处理，所以肌细胞应该是进行分裂了，想问您有没有试验过程中可以分离细胞碎片的药品呢？

niwanmao · 发表于 2021-3-5 12:17:45

heybibna 发表于 2021-3-5 10:24
怎么去除粘连细胞呢，我的试验经过特殊处理，所以肌细胞应该是进行分裂了，想问您有没有试验过程中可以分 ...

一般分辨率好的机器，通过FSC和SSC是能分开的。
像你这台机器，不需要用什么特殊方式，可以参考@tiger 站友所说的那样，利用核酸含量，直接在PI上面把碎片和细胞分开即可。

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