肿瘤组织中免疫细胞的检测

不停

各位老师好，我最近进行了小鼠皮下成瘤，检测肿瘤组织中免疫细胞浸润情况，下面是我的圈门策略，想请大家帮忙看看这个圈门有没有问题，以及为什么CD19和CD3的分群为什么这么不明显。这个是已经调过补偿了的。

niwanmao

你是否通过酶消化解离的？

不停

niwanmao 发表于 2022-5-23 17:47
你是否通过酶消化解离的？

有的，四型胶原酶，一型DNAse酶还有透明质酸酶，消化时间的话在20分钟左右

niwanmao

不停 发表于 2022-6-6 00:50
有的，四型胶原酶，一型DNAse酶还有透明质酸酶，消化时间的话在20分钟左右 ...

初步考虑是酶消化导致的分群不清。你可以同时比对酶解法和机械解离法，看看细胞得率和分群情况。

CART

老师你好，为什么cd45只圈了最下面一个小群，而不是分析所有cd45阳性细胞。谢谢老师的解答

niwanmao

CART 发表于 2022-6-23 13:50
老师你好，为什么cd45只圈了最下面一个小群，而不是分析所有cd45阳性细胞。谢谢老师的解答 ...

因为楼主要分析淋巴细胞，淋巴细胞的特征是CD45++、SSC最小。

zjjxqsm2008

题主和倪老师您好，我们也是在小鼠皮下成瘤检测肿瘤组织中免疫细胞浸润情况，发现CD3+CD4-CD8-的一群细胞，数量超过CD4+和CD8+加和。我看您最后一个图Q4也有一定比例的CD3+CD4-CD8-细胞，请问这是否正常？

范晋波

zjjxqsm2008 发表于 2023-11-23 09:23
题主和倪老师您好，我们也是在小鼠皮下成瘤检测肿瘤组织中免疫细胞浸润情况，发现CD3+CD4-CD8-的一群细胞， ...

CD3+比CD4+CD8多的原因有很多，CD8弱阳是否圈起，CD3门是否圈多，CD4/CD8的抗体染色是否有问题（少染）等等~ 还有肿瘤自发荧光可能会很高，圈门对很重要

zjjxqsm2008

范晋波 发表于 2023-11-23 10:04
CD3+比CD4+CD8多的原因有很多，CD8弱阳是否圈起，CD3门是否圈多，CD4/CD8的抗体染色是否有问题（少染）等 ...

好的，谢谢您，我们再看看数据，我们肿瘤细胞确实很多，需要调整一下配色方案吗？有特别需要避开的通道吗？

范晋波

zjjxqsm2008 发表于 2023-11-24 11:26
好的，谢谢您，我们再看看数据，我们肿瘤细胞确实很多，需要调整一下配色方案吗？有特别需要避开的通道吗 ...

CD45用FITC分群比较不错