贴壁巨噬细胞怎么处理染流式抗体

秦德猛

问一下老师们，像腹腔巨噬细胞这样的贴壁能力较强的细胞，如何处理收细胞染流式比较好呢。我们之前都是强行用胰酶消化，可是消化久了巨噬死了好多。又看到有的帖子说可以直接用细胞刮刀直接刮下来离心染抗体，这样子方法可行吗？

niwanmao

胰酶消化时间很有讲究，可以用比较温和的酶（如Accutase等）试试。

刮刀机械法也是可以的，但也会损伤。

没有两全齐美的方法，但可以做到尽量减少损伤。

CBJ

像需要检测膜表面marker的细胞，推荐用Accutase好一点，胰酶容易影响膜蛋白的检测。还可以酶消化后用刮刀刮的方法，但是消化时间需要预实验确定。

秦德猛

niwanmao 发表于 2023-3-20 18:20
胰酶消化时间很有讲究，可以用比较温和的酶（如Accutase等）试试。

刮刀机械法也是可以的，但也会损伤。

谢谢老师。我回去试一下用刮刀效果怎么样的吧。

秦德猛

CBJ 发表于 2023-3-21 10:41
像需要检测膜表面marker的细胞，推荐用Accutase好一点，胰酶容易影响膜蛋白的检测。还可以酶消化后用刮刀刮 ...

嗯嗯。十分感谢！

mybiosciences

是经过体外培养了吗？