请问流式标本制备有关液体保存时间

ganlimi · 发表于 2011-8-4 20:03:07

         请问0.5%BSA+0.1%NAN3 、1%多聚甲醛+0.1%NAN3 PBS PBS 于4℃冰箱可以放多久？
         封闭液2%的BSA又怎么保存？
         谢谢！

ganlimi · 发表于 2011-8-4 20:06:53

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2%多聚甲醛怎么保存，可以保存多久？

niwanmao · 发表于 2011-8-4 21:47:53

ganlimi 发表于 2011-8-4 20:03

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请问0.5%BSA+0.1%NAN3 、1%多聚甲醛+0.1%NAN3 PBS PBS 于4℃冰箱可以放多久？
封闭 ...

你所提到的这些物质中，只有BSA涉及到蛋白质，是有一定保存时间限制，其他物质全部都是非常稳定的无机物，毒性也稳定，不需要考虑其保存时间和条件。

关于BSA的保存，因为我们平时主要做免疫分型，也不使用它来封闭，所以不太了解，搜索了下，在别的论坛发现这么一个回答，希望对你有所帮助：

我用两种方法保存：
（1）5g/L的或 10g/L的，5ml EP管储存，-20℃保存，一年都没问题。

（2）0.05-1g/L，一般用玻璃容器4度保存，为了防止长菌溶液变浑，我会在溶液里面滴2-5 d 的 1M的NaOH，调pH在 11-12。高 pH可以很好地抑制长菌，而且不妨碍BSA为标准蛋白测定蛋白。（Lowry 法）
这样可以放半年，我就只放到半年。。。再长的没用过。

chujindong · 发表于 2011-8-4 21:51:45

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我用的时候一般用多少配多少。有人跟我说可以4度放一个星期，是什么道理还不知道。

niwanmao · 发表于 2011-8-4 21:54:59

chujindong 发表于 2011-8-4 21:51

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我用的时候一般用多少配多少。有人跟我说可以4度放一个星期，是什么道理还不知道。 ...

没错，现配现用时最好的。剩余的BSA可以分几个小的EP管冻到-80度

sfqiang23 · 发表于 2011-11-4 00:03:44

细胞抗体孕育后，用多聚甲醛固定后离心洗涤加pbs于冰箱中保存？还是直接加多聚甲醛后于冰箱中保存？

niwanmao · 发表于 2011-11-4 09:02:24

sfqiang23 发表于 2011-11-4 00:03

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细胞抗体孕育后，用多聚甲醛固定后离心洗涤加pbs于冰箱中保存？还是直接加多聚甲醛后于冰箱中保存？ ...

在另外一个帖子中提过这事儿：

从站友的测试结果看：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... =1759&fromuid=1，应该看标记而定。
所以我建议你最好先做过比较，如果比较后发现：
1、多聚甲醛固定之后对抗原结合没影响，就可以先加多聚甲醛，放冰箱里保存。具体时间确实没人做过，按照我们平时的经验，我估计4－7天应该可以。
2、如果多聚甲醛对抗原结合有影响，则应该先加抗体孵育，后加多聚甲醛固定，这个时候，由于抗体的荧光会衰减，所以最好不要超过24小时。

samly0 · 发表于 2011-11-4 09:30:24

我看见有帖子做胞内染色是先溶血，后破膜，最后再用1%多聚甲醛固定的，跟我们常用的方法有点不同，我们都是先固定再破膜的，请问做胞内染色先固定和最后固定有没有什么区别？

niwanmao · 发表于 2011-11-4 10:09:14

samly0 发表于 2011-11-4 09:30

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我看见有帖子做胞内染色是先溶血，后破膜，最后再用1%多聚甲醛固定的，跟我们常用的方法有点不同，我们都是 ...

胞内染色强烈建议先固定，后破膜，否则胞膜的标记容易丢失。

samly0 · 发表于 2011-11-4 10:14:16

好的，谢谢老师

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