关于不同的封闭液测受体占位对实验结果的影响

srfts · 发表于 2022-9-28 17:21:12

人的血样，测试RO。因为FC封闭用的小鼠血清未到货，暂时使用人混合血清进行封闭，发现与未封闭组相比信号值很低。请问不同的封闭液会对结果产生较大影响吗？

niwanmao · 发表于 2022-9-28 19:37:18

效果肯定会有差异的，尤其是血清来封闭，不同批次的血清，球蛋白水平有差异，阻断效果也会有差异。

其实最稳定的，还是商品化的100 μg/mL 纯化的人 IgG

srfts · 发表于 2022-9-29 09:15:27

niwanmao 发表于 2022-9-28 19:37
效果肯定会有差异的，尤其是血清来封闭，不同批次的血清，球蛋白水平有差异，阻断效果也会有差异。

其实最 ...

请问对老鼠也可以用这个igG吗。

hezeljgouc · 发表于 2022-9-29 10:06:03

小鼠样品因该使用CD16/32抗体来封闭Fc。另，有个疑惑，使用小鼠血清封闭人细胞样品Fc能行吗，小鼠IgG的Fc段能和人的Fc受体结合？

srfts · 发表于 2022-9-29 11:06:45

hezeljgouc 发表于 2022-9-29 10:06
小鼠样品因该使用CD16/32抗体来封闭Fc。另，有个疑惑，使用小鼠血清封闭人细胞样品Fc能行吗，小鼠IgG的Fc段 ...

一般是拿抗体来源种属的血清做封闭，我的抗体是小鼠来源的。因为我之前小鼠血清没到货所以拿了混合人血清现在发现结果差异大，准备做个确认实验。

H4nn1 · 发表于 2022-9-29 14:57:42

hezeljgouc 发表于 2022-9-29 10:06
小鼠样品因该使用CD16/32抗体来封闭Fc。另，有个疑惑，使用小鼠血清封闭人细胞样品Fc能行吗，小鼠IgG的Fc段 ...

最好不要，因为FcR结合小鼠和人的Fc的亲和力差异还是挺大的

niwanmao · 发表于 2022-9-29 19:45:07

srfts 发表于 2022-9-29 09:15
请问对老鼠也可以用这个igG吗。

小鼠不能用人IgG的。如前面的站友所说，是需要用专门的Fc阻断剂（如CD16/CD32）

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