JC-1圈门补偿调节

liuchangzhe · 发表于 2022-10-25 22:21:04

小弟新做jc-1，对于流式不熟系，请问版主及各位大神，我这个数据和我在论坛里看到的大部分jc-1数据不太一样，我的右上角出现双阳性，对照相比于处理组从图上看左下角出现明显下降，不知道问题出在哪里改如何分析，我的阳性门是应该圈在那个群体？是右上角还是左下角的细胞群体

niwanmao · 发表于 2022-10-25 22:21:05

liuchangzhe 发表于 2022-10-28 09:34
请老师们帮忙看一看，是不是在圈门的时候需要把已经凋亡坏死的细胞排除，然后直接根据cccp组与对照组的区别 ...

因为JC-1要分析的是线粒体膜电位降低的细胞，而这些细胞都是发生在凋亡早期，所以此时细胞形态不应该发生改变，故应该在FSC/SSC上排除那些已发生FSC减小的细胞。

但是，这些FSC减小的细胞，可以作为设门参照，按这些参照设好门，再圈回FSC/SSC正常的细胞分析。

liuchangzhe · 发表于 2022-10-28 09:34:29

请老师们帮忙看一看，是不是在圈门的时候需要把已经凋亡坏死的细胞排除，然后直接根据cccp组与对照组的区别把红光下降的细胞圈为早调群体呢，我最不理解的就是图中右上角红光绿光都加强的细胞群体是不是因为我补偿调节不足的原因没有往下降，是否这群细胞才是我的目标群体呢，望各位老师不吝赐教

liuchangzhe · 发表于 2022-10-29 17:55:40

niwanmao 发表于 2022-10-28 22:13
因为JC-1要分析的是线粒体膜电位降低的细胞，而这些细胞都是发生在凋亡早期，所以此时细胞形态不应该发生 ...

感谢倪老师回复，我刚才把FSC减小的细胞排除了，发现右边那一团fitc增强的细胞就是FSC减小的细胞，那是不是意味着我的阳性群体是cccp组中PE减小往下坠的细胞，我使用正常的十字门划分可以吗，还是说要拉斜十字门，另外您看我的补偿还需要调节吗

niwanmao · 发表于 2022-10-30 08:14:47

liuchangzhe 发表于 2022-10-29 17:55
感谢倪老师回复，我刚才把FSC减小的细胞排除了，发现右边那一团fitc增强的细胞就是FSC减小的细胞，那是不 ...

可以只圈右边那群，代表MΦ降低的群体比例变化。

liuchangzhe · 发表于 2022-10-30 16:28:19

niwanmao 发表于 2022-10-30 08:14
可以只圈右边那群，代表MΦ降低的群体比例变化。

我在去除FSC小的细胞群后依据倪老师之前的帖子的方法画的门，您看这样可以吗，还是说需要画斜十字门，因为右边那群细胞实际上大部分是fsc较小的细胞

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[凋亡检测] JC-1圈门补偿调节