双阈值的应用场景

wmj123456

有些仪器具有双阈值的功能，请问下哪些实验场景/实验类型中需要用到？

niwanmao

由于现在可以获取后再分析，我觉得阈值的作用相对弱化了一些。

双阈值，我们一般最多用在只用FSC无法完全排除干扰信号时，会加一个荧光信号作为阈值去进一步排除。

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-8-31 08:27
由于现在可以获取后再分析，我觉得阈值的作用相对弱化了一些。

双阈值，我们一般最多用在只用FSC无法完全 ...

倪老师，如果是外周血样本，只加了CD3/4/8，没有加CD45，里面又有计数微球，用FSC设置阈值不太合适吧，可能会切掉微球。如果第一张FSC，SSC中碎片多，和淋巴细胞分群界限不太明显，您会怎么切？会尝试用CD3-PerCP切吗？

niwanmao

wmj123456 发表于 2023-12-8 23:02
倪老师，如果是外周血样本，只加了CD3/4/8，没有加CD45，里面又有计数微球，用FSC设置阈值不太合适吧，可 ...

加了微球，FSC不适合，但是SSC是适合的。

不过如果真遇到FSC/SSC碎片和淋巴分不开的情况，此时，只能想办法先保证淋巴获取完整，事后分析时，通过特异性标记排除掉碎片信号，保证白细胞数的准确性

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-12-9 09:10
加了微球，FSC不适合，但是SSC是适合的。

不过如果真遇到FSC/SSC碎片和淋巴分不开的情况，此时，只能想 ...

好的，谢谢倪老师

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-12-9 09:10
加了微球，FSC不适合，但是SSC是适合的。

不过如果真遇到FSC/SSC碎片和淋巴分不开的情况，此时，只能想 ...

倪老师，我前几天发布了一个帖子(CD3+T有些奇怪)，CD3+T奇怪，想请教下您，在临床上是否见过FSC和ssc中，有比较大的一群细胞？而且用FSC-A和FSC-H去粘连的时候，部分在粘连体的位置，大部分在FSC-H大和FSC-A小的位置