淋巴结消化CD8表达消失

kloading

新鲜淋巴结提取后胶原酶4（1mg/ml），DNase1（0.2mg/ml）1640无血清培养基中消化30min，未裂红，上机检测发现CD8+T细胞群全部消失，求解原因

niwanmao

酶消化后，最怕的就是这个事情，消化时间很有讲究，既要解离成单细胞，又不能过。

建议做一次机械法（快速研磨15秒），试试

kloading

谢谢您，我尝试一下

H4nn1

对于脾脏和淋巴结组织都是在滤网上直接研磨来提取单个细胞就好了，除非像肿瘤组织，皮肤这种是酶解加机械力一起上

AAAAAjjj

我之前做淋巴结都是直接在细胞滤器上用注射器橡胶塞那头去研磨，细胞活性很好，有组织碎块就过滤两次

zdvfsadb

淋巴结处理我是用40um滤网研磨后离心、重悬，然后标准流程做完，没遇到过细胞活性问题。不过淋巴结周边组织不要取太多，不然在设门的前几张图会不那么好看。