血液mnc细胞流式请教，isotpye阳性群，淋巴群旁边的奇怪细胞群

安英

实验为研究健康人外周血treg细胞，流式细胞仪为bd calibur, 四色panel（FITC,PE,PECY7,APC).现遇到奇怪的结果，已经在5个样本中出现，诚恳请教前辈们！

问题：1）图一标识1所指的群是什么细胞？这个群在isotype和染色的管子里都有出现，可见图二的单染管（图二红圈标识），这个是粒细胞吗？粒细胞不是用ficoll去掉了吗，为什么还会出现？

2）isotype边缘有一条阳性群线（图一标识2），这个是杂质还是电压设置问题？怎么能保证背景干净？

3）PE-cy7的isotype有阳性群（图一标识3），这个是非特异染色吗？我已使用全新的isoPE-cy7抗体，确保抗体没被污染，但这个群仍有出现，查阅文献抗体可能是fc段特意染色，但仍不确认，请前辈赐教！

niwanmao

箭头1的右侧那些是中性粒细胞，即使 Ficoll提取，也会有中性粒的。

图1的1、2、3以及图2这些所指区域，总体来说，还是跟管路不干净相关性更大

安英

niwanmao 发表于 2024-4-26 09:30
箭头1的右侧那些是中性粒细胞，即使 Ficoll提取，也会有中性粒的。

图1的1、2、3以及图2这些所指区域，总 ...

感谢倪老师指教！我会清洗管道再试一下