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发表于 2012-4-27 09:27:16
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首先非常欢迎你来流式中文网一起交流，你做的动物流式确实是我们没有做过的，很值得我们学习。
因为是我没有做到过的，所以有些内容我只能从理论上试着解释一下：
第一个为什么我的流式结果中只能选择FSC和SSC，不能选择是H（高度）还是A(面积)？我的那张图的坐标上FSC和SSC后面都有一个小横杠，是不是我哪里的设置有问题？
FSC-H和FSC-A之类的，跟仪器有关，像我现在用的CALIBUR就没有FSC-A。一般情况下两者通用，除非为了排除团块，需用FSC-H/FSC-A双坐标图。
第二个问题，是不是以哪种形式显示，对数还是线性，必须在检测的时候就设定好，一旦检测完了就不能改了？
如果细胞很小，建议要用对数模式获取。获取后是否能改，跟你的仪器、分析软件有关。这个可以请haven_t解答一下。
第三个是，双参数等高图是在检测完后以另外一种形式显示散点图的结果，还是检测的时候要提前设定好才能显示？
等高图是分析时画出来的一种图形，可以在分析软件中选择，不需要提前设好。
第四个是，通常这些不同通道的电压值的设定有没有什么范围，比如FSC最大不能超过多少，最少不能少于多少？还是，只要能有好看的图形，多大都可以调，这样会损坏仪器吗？
各个通道最大值每个仪器都有限制的，你调到最大就调不上去了。不用担心损害仪器。
第五个是，检测时细胞通过的流动速度一般选择多大？检测多少颗粒数才是有效的？因为我看到我的那张图上，检测细胞数少的时候貌似还有两个峰的样子，等检测颗粒数多，流速增大后，就成一个峰了，而且不尖锐。
流速会影响检测精度，例如为了使细胞周期的CV值降低，一般建议以低速获取。
第六，我的细胞是有多种细胞但是没分开，还是干脆红细胞就没裂解好？
我不知道鲤鱼血中是否也存在淋巴细胞或者粒细胞之类的？所以很难判断。如果有相关的抗体，建议用相关的抗体标记看看。
第七，关于设门，是不是可以全检测完了，数据分析的时候再设门，还是先跑一个样品设门后，保存下来，其它样品都要按照这个条件来检测？因为PI染色的时候，是先拿对照设一个门，然后再加PI染色的样本（对吗？是这样？），那这个FSC-SSC是不是不需要这样？
设门可以在检测完了再设。
第八，关于CV值，如果CV值太大，可能是什么原因，应该怎么调整呢？
CV值大跟很多因素都有关：抗体、标本质量、获取速度。
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发表于 2012-4-27 00:24:47
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