裂解红细胞未离心直接加PBS，可行吗？

刘星宇 · 发表于 2013-2-3 23:04:28

本人实验是流式检测白细胞胞膜受体表达的情况。我们想加入红细胞裂解液反应大约10分钟后，直接加入2~3倍体积的1XPBS，然后再离心，以减少后续的洗涤次数，请问论坛里的老师，这样是否可行？但1X的PBS以及红细胞裂解液都会被稀释，对细胞会有多大影响？

niwanmao · 发表于 2013-2-4 08:40:01

也可以。不太会影响。

像我们是2ml氯化铵裂解液裂解完成后，直接离心去上清，再用pbs洗涤一次，有时候不用pbs再洗，发现没什么差别。

samly0 · 发表于 2013-2-4 09:21:08

可以，我就是直接加两倍体积的PBS混匀后再离心的，没什么影响

刘星宇 · 发表于 2013-2-4 23:18:03

看来我们要多加点红细胞裂解液，之前按说明书加3倍体积量，后来加到1ml（50ul血），后面需要洗涤三四遍才行！真的是实践经验比推荐建议更重要啊！

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