DC体外刺激淋巴细胞增殖

pushiming77

samly0 发表于 2013-8-11 11:49

                               
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我们也是用BABL/c的DC来刺激C75BL/6的脾脏T细胞，不过先用BABL/c的单个核细胞体外刺激诱导出成熟DC，再与 ...

不过先用BABL/c的单个核细胞体外刺激诱导出成熟DC，是这是怎么做的。我做这个实验不理想呢，求师姐赐教。

samly0

我们是取小鼠骨髓做的，取的时候一定要尽可能将骨头上的结缔组织和肌肉组织剔除干净，以免诱导出成纤维细胞等其细胞，取出来过200目滤网，Tris-NH4Cl裂红，洗涤后重悬，铺六孔板，一只小鼠可以大概铺一版，加刺激体系：终浓度为GM-CSF 10ng/ml, 1ng/ml IL-4，培养48h后换全液，第四天换半液，真正成熟DC要养7到8天，也可在第5天加LPS（100ng/ml）刺激，第6天就可以收集来用了，成熟DC的抗原递呈能力比未成熟的强。