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[淋巴细胞相关] 流式检测小鼠脾脏杀伤性T细胞比例遇到问题

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发表于 2014-5-28 21:16:54 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
我用的是BD VERSE这台机器做的流式检测,一共是四色,分别是FITC-CD4,PerCP-cy5.5-CD3, APC-CD8和PE-CD28。检测使用的是C57空白小鼠的脾脏,但是我检测出来CD28在淋巴细胞中的比例只有3%-4%,然后CD8+CD28+双阳的比例小于0.5%。
不知大家有没有做过类似的检测,希望可以得到大家的帮助。



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从下面的分析图看,这个CD28似乎真表达不出来,可以跟厂家联系一下,或许是质量问题。CD28一般表达在60%~80%的外周血T细胞,在CD4+ T细胞上表达率95%,CD8+ T细胞上约50% 同型对照: 实验管
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发表于 2014-5-28 21:16:55 | 显示全部楼层
fernazy 发表于 2014-5-28 22:31
CD28是连续峰分群不明显,

从下面的分析图看,这个CD28似乎真表达不出来,可以跟厂家联系一下,或许是质量问题。CD28一般表达在60%~80%的外周血T细胞,在CD4+ T细胞上表达率95%,CD8+ T细胞上约50%

同型对照:

同型

同型



实验管

检测管

检测管



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发表于 2014-5-28 21:54:36 | 显示全部楼层
分群是否明显?有数据文件最好能上传。流式都要看图的。
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 楼主| 发表于 2014-5-28 22:31:39 | 显示全部楼层
CD28是连续峰分群不明显,

spleen.rar

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 楼主| 发表于 2014-5-30 20:51:07 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2014-5-28 21:54
分群是否明显?有数据文件最好能上传。流式都要看图的。

请老师指教一下,谢谢
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 楼主| 发表于 2014-5-30 22:37:46 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2014-5-30 21:39
从下面的分析图看,这个CD28似乎真表达不出来,可以跟厂家联系一下,或许是质量问题。CD28一般表达在60% ...

谢谢老师 我用的是C57小鼠的脾脏进行的染色
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 楼主| 发表于 2014-5-30 22:53:41 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2014-5-30 21:39
从下面的分析图看,这个CD28似乎真表达不出来,可以跟厂家联系一下,或许是质量问题。CD28一般表达在60% ...

我用的是BD公司的抗体。。我和他们的技术支持再联系一下吧。。谢谢老师。。。
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发表于 2014-5-31 08:16:56 | 显示全部楼层
fernazy 发表于 2014-5-30 22:53
我用的是BD公司的抗体。。我和他们的技术支持再联系一下吧。。谢谢老师。。。 ...

因为从CD4、CD8来看,染色没有问题,所以只能往CD28抗体质量那边考虑了。有结果及时反馈
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