关于间充质阴性PANEL的滴度问题

水念人倦

各位老师好，最近本人在做MSC的一个阴性方案，计划用PE做CD34 CD45 CD19 CD14 HLA-DR的PANEL。
其中大部分抗体说明书上是20微升，还有一两个是5微升的，请问这个滴度该如何确定呢？求老师们指点~~

niwanmao

对于这种微量细胞，抗体滴定可能是成问题，因为没有明显的阳性峰。
此时，我只能建议你用推荐量了

水念人倦

niwanmao 发表于 2015-5-5 15:34
对于这种微量细胞，抗体滴定可能是成问题，因为没有明显的阳性峰。
此时，我只能建议你用推荐量了
...

谢谢倪老师，不过我们的MSC量不成问题，基本上可以确定阴性是100%,我就是纠结没有阳性的话，滴定出来的量有可信度么？
如果我们用推荐量的话，100ul的细胞悬液+100ul的抗体。。会不会很夸张。。
烦请倪老师给点意见~~

niwanmao

水念人倦 发表于 2015-5-6 08:57
谢谢倪老师，不过我们的MSC量不成问题，基本上可以确定阴性是100%,我就是纠结没有阳性的话，滴定出来的量 ...

根据临床操作的经验，这样做问题不大。

水念人倦

niwanmao 发表于 2015-5-6 09:28
根据临床操作的经验，这样做问题不大。

请问您的意思是用阴性做滴度问题不大？还是100ul细胞液+100ul抗体问题不大？

niwanmao

水念人倦 发表于 2015-5-6 14:00
请问您的意思是用阴性做滴度问题不大？还是100ul细胞液+100ul抗体问题不大？ ...

100+100问题不大。

chymanhz

水念人倦 发表于 2015-5-6 08:57
谢谢倪老师，不过我们的MSC量不成问题，基本上可以确定阴性是100%,我就是纠结没有阳性的话，滴定出来的量 ...

你用的什么抗体，推荐要100ul？

水念人倦

chymanhz 发表于 2015-5-6 21:35
你用的什么抗体，推荐要100ul？

是阴性组合，每个推荐用量20.