人外周血Treg表达比例问题

暖希贤

分选人血CD4+细胞，加入IL-2、TGF-β培养，检测Treg（CD4+CD25+FOXP3)占CD4+细胞的比例，CD4-FITC，CD25-APC，PE-foxp3，自己分析的是占百分之十几的比例，看文献加入IL-2、TGF-β都可以到达百分之50的比例，不知道是自己的分析问题还是其他？附件是三标的文件，没做同型对照，调电压的细胞没破核膜，三标组破核膜后位置都改变了，感觉没法画门

niwanmao

比例占CD4＋的 13.06％

暖希贤

niwanmao 发表于 2016-1-27 10:18
比例占CD4＋的 13.06％

老师，我调电压和单标、双标组都没有破核膜，这样会不会产生很大影响？就直接这样不规则画门就行么？双标组没有画门的价值么？

niwanmao

暖希贤 发表于 2016-1-27 11:19
老师，我调电压和单标、双标组都没有破核膜，这样会不会产生很大影响？就直接这样不规则画门就行么？双标 ...

什么意思？没有破核膜为什么PE通道会有这群荧光？

暖希贤

niwanmao 发表于 2016-1-27 17:16
什么意思？没有破核膜为什么PE通道会有这群荧光？

三标的我破核膜了，就是用来调电压的细胞，还有只标FITC-CD4的那组细胞没有破核膜处理，这样调的电压和补偿可以用么？

niwanmao

暖希贤 发表于 2016-1-29 10:50
三标的我破核膜了，就是用来调电压的细胞，还有只标FITC-CD4的那组细胞没有破核膜处理，这样调的电压和补 ...

那几组对分析没有影响。你这个标本本来就可以直接分析啊。

暖希贤

niwanmao 发表于 2016-1-29 14:43
那几组对分析没有影响。你这个标本本来就可以直接分析啊。

老师，调电压组和FITC单标组、APC fitc 双标组的不破核膜对分选没有影响，但是是不是电压和补偿会调的不准确呢？谢谢老师

niwanmao

暖希贤 发表于 2016-3-31 16:56
老师，调电压组和FITC单标组、APC fitc 双标组的不破核膜对分选没有影响，但是是不是电压和补偿会调的不 ...

呃，我没看懂什么意思

暖希贤

niwanmao 发表于 2016-3-31 20:11
呃，我没看懂什么意思

老师，我的意思是我调补偿的那组并没有进行破核膜的处理，但是标foxp3的那组破核膜了，这会造成了细胞形态的改变，这样可以调补偿么？

niwanmao

暖希贤 发表于 2016-4-7 21:08
老师，我的意思是我调补偿的那组并没有进行破核膜的处理，但是标foxp3的那组破核膜了，这会造成了细胞形 ...

可以啊，问题不太大。