核内染色

xiandaxie · 发表于 2016-8-20 11:28:33

大家好，请教关于破膜的问题。我想检测一个转录因子在核内的情况，已经做过胞内该转录因子的染色，明确知道这个转录因子在胞质内也有表达。请问我该如何特异的检测该转录因子在核内的表达。另外想问关于破膜剂的问题：我胞内染色做用的是BD公司的破膜剂，核内检测的破膜剂该怎么选择？

niwanmao · 发表于 2016-8-20 11:28:34

流式可以检测细胞内的抗原表达，但无法区分胞内和核内，这是技术目前的限制，希望以后能够有解决方法，至少目前没办法做到。

破核膜的破膜剂，可以选择科研用的FoxP3染色kit中的破膜剂，也可以自己加Triton X-100或Tween-20等：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5191-1-1.html

xiandaxie · 发表于 2016-8-20 16:49:35

本帖最后由 xiandaxie 于 2016-8-21 09:39 编辑

谢谢。在这儿再向您请教一个flowjo的问题。我用C6跑出来的数据用flowjo分析B细胞亚群，发现很多细胞压线（60%压线）是怎么回事？我调坐标后图很不好看，又不想用C6的图，想请有什么办法吗？

xiandaxie · 发表于 2016-8-20 16:52:25

本帖最后由 xiandaxie 于 2016-8-21 09:38 编辑

这是分别作出来的图

niwanmao · 发表于 2016-8-20 16:55:03

xiandaxie 发表于 2016-8-20 16:52
这是分别作出来的图

点击纵坐标的T按钮，选择Biexp模式转换一下。

xiandaxie · 发表于 2016-8-21 09:36:02

这样转换过，可是图还是不好看。下面压的细胞让人感觉是分群了的细胞。

niwanmao · 发表于 2016-8-21 09:49:40

xiandaxie 发表于 2016-8-21 09:36
这样转换过，可是图还是不好看。下面压的细胞让人感觉是分群了的细胞。

那看来flowjo对C6的数据还没法做到完美支持，你只能用C6的软件分析了。

xiandaxie · 发表于 2016-8-21 10:11:08

好的，谢谢您啦！！！

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[细胞因子检测] 核内染色

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