判断细胞生死，用荧光染色剂前细胞一定要洗吗

siska

各位前辈好，我是刚刚接触实验的小白。想请教两个很基础的问题。
1、我想用SYTOX 7AADvanced 这个染料测细胞生死。但是一般都要用PBS洗，再加试剂孵育。
可是一洗，很多死细胞不都洗没了吗？结果会有影响吗？
2、我现在的实验室是在初始浓度10^5/ml的细胞里加药，然后每3小时看生存率。我是放在24孔板里
培养的，每个孔1ml。 本来细胞就不多，洗完细胞，量会损失很大。 有没有什么合适的实验方案调整的办法。
还是我这种情况不适合流失细胞仪来测？
3、细胞数量少，同样体积（1ml混悬液），可以加的染色剂也减少吗？


这么蠢的问题还拿来问，希望前辈指导，非常感谢大家。

niwanmao

1、一般不会的，适当的离心速度，去掉的基本上都是碎片，细胞丢掉不多的。
2、如果加药后细胞死亡较大的话，还是建议采用台盼蓝染色吧。
3、在一定的细胞数量范围内，染色成份是不能变的，一般跟体积的关系更大。