流式做外周血单核细胞内两个抗原的表达求助谢谢！

niwanmao · 发表于 2010-8-1 21:25:09

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南瓜妹妹 · 发表于 2020-5-22 08:28:45

倪老师，有问题想请教您一下，检测患者单核细胞内细胞因子IL-10和TGF-β需要用LPS、BFA刺激过夜吗？我看到有些中文的文章是全血培养LPS刺激24小时、BFA最后四小时加入，后裂红孵育抗体，一篇英文文献里看到全血培养加BFA刺激4h后表染后胞内染色

niwanmao · 发表于 2020-5-22 12:27:23

南瓜妹妹发表于 2020-5-22 08:28
倪老师，有问题想请教您一下，检测患者单核细胞内细胞因子IL-10和TGF-β需要用LPS、BFA刺激过夜吗？我看到 ...

应该是LPS和BFA一起加，孵育4小时才对，可参考下面这篇BD的Protocol，蛮详细：

IC_Monocyte.pdf (102.28 KB, 下载次数: 17)

lxk47640 · 发表于 2020-6-8 10:34:43

倪老师，有个问题探讨一下：我们想检测某种临床病例和健康对照中单核细胞几个亚群的IL-10的产生情况，大多数文章是全血或者分离PBMC后用LPS或其他刺激物刺激几小时后再进行标记检测。但是我认为这样是否反映的是临床病例和健康对照的单核细胞对刺激物的反应能力，而并不表示它体内现有的生成状态？

niwanmao · 发表于 2020-6-8 17:47:09

lxk47640 发表于 2020-6-8 10:34
倪老师，有个问题探讨一下：我们想检测某种临床病例和健康对照中单核细胞几个亚群的IL-10的产生情况，大多 ...

检测单核细胞对刺激物的反应能力，就是鉴定单核细胞的功能。
如果你想测本身的分泌水平，一般很难测的到，除非病理状态下。

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