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楼主: xuepingyu180

[结构和原理] 不同的流式细胞仪间的平强荧光强度有互相转换的公式不?

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发表于 2023-6-5 19:57:30 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2023-6-5 19:41
比较两台机器MFI差值也不行,因为MFI不同,其范围也会不同。

必须如我前面所说,要用标准荧光微球,实现 ...

好的,谢谢倪老师的及时回复。
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发表于 2023-6-5 20:13:24 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-10-18 21:19
用标准荧光微球,可以实现不同机型换算的,之前Euroflow做过这项工作。

这里面的标准荧光微球可以用单峰的微球吧?Euroflow做过?有相关的资料吗?
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发表于 2023-6-5 20:26:24 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2023-6-5 20:13
这里面的标准荧光微球可以用单峰的微球吧?Euroflow做过?有相关的资料吗? ...

专门有荧光定量微球,Raindow或Spherotech都有,搜一下就搜到了。

步骤就参考微球的说明书即可。
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发表于 2023-6-5 22:19:30 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2023-6-5 20:26
专门有荧光定量微球,Raindow或Spherotech都有,搜一下就搜到了。

步骤就参考微球的说明书即可。 ...

倪老师,可能还得进一步请教您,怎么用荧光微球来统一呀?譬如要比较APC+的MFI,先在A仪器得出微球和细胞的MFI值,然后在B仪器上,在相同的微球的MFI的情况下,再换算出细胞的MFI?我感觉还是没有怎么理解
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发表于 2023-6-6 07:33:03 | 显示全部楼层
wmj123456 发表于 2023-6-5 22:19
倪老师,可能还得进一步请教您,怎么用荧光微球来统一呀?譬如要比较APC+的MFI,先在A仪器得出微球和细胞 ...

在A机器上,用标准荧光定量微球,做出一条标准曲线,这条标准曲线对应的是A机器的MFI转换到绝对荧光数量的公式,这样,A机器上的MFI,可以通过此公式转换为绝对荧光量。

同样,在B机器上以相同的步骤建立B机器对应的标准曲线,这样B机器的MFI也可以通过另一条公式转换为绝对荧光量。

最后,你要比对的是最终计算出来的绝对荧光数量。
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