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[其它] 我想请教一下这突然出现的一群细胞到底是什么细胞呢?

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发表于 2019-4-6 13:53:27 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
各位同道还有倪老师大家好,我想咨询一下,我分的小鼠组织内的免疫细胞,先过了percoll之后,先圈了一下免疫细胞大致的位置,去了黏连,去了死细胞,然后排除了一下可能的自发荧光,然后第一个染的免疫细胞共有的makerCD45,但是第一个样品阴阳性群之间出现一群细胞,其他样品都没有,我之前也没遇到过,请问大家有知道这是怎么回事吗?

图1

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图2

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我们平时遇到过几次诡异的事情,仪器就认准一个样本,死活就跑不好,换了个人重新处理后方可恢复正常。 目前对于这些信号,一定要找原因,一下子挺难定下来的,我个人感觉像是非特异性染色,与样本有关,但是解决还是容易的,就是像你这样设门排除掉即可。
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发表于 2019-4-6 13:53:28 | 显示全部楼层
紫景风麟315 发表于 2019-4-9 08:54
谢谢倪老师的回复,我分的是小鼠的睾丸细胞,几个不同样本分别染了不同的染色方案,只有这一个样本在不同 ...

我们平时遇到过几次诡异的事情,仪器就认准一个样本,死活就跑不好,换了个人重新处理后方可恢复正常。

目前对于这些信号,一定要找原因,一下子挺难定下来的,我个人感觉像是非特异性染色,与样本有关,但是解决还是容易的,就是像你这样设门排除掉即可。
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 楼主| 发表于 2019-4-7 10:48:01 | 显示全部楼层
自己顶一个
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发表于 2019-4-8 12:15:11 | 显示全部楼层
这种情况是有可能,具体的原因可能需要结合具体的样本来回顾,像我们在临床上偶尔见到类似的情况,原因主要是:
1、仪器偶发异常干扰信号。
2、样本中某些细胞的非特异性染色(临床上常见胸水中的巨噬细胞之类)。
3、粘连信号
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 楼主| 发表于 2019-4-9 08:54:12 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-4-8 12:15
这种情况是有可能,具体的原因可能需要结合具体的样本来回顾,像我们在临床上偶尔见到类似的情况,原因主要 ...

谢谢倪老师的回复,我分的是小鼠的睾丸细胞,几个不同样本分别染了不同的染色方案,只有这一个样本在不同染色方案中的刚开始圈CD45的时候都有这种情况,其他样本都没有,另外,我看了这群细胞肯定不是死细胞,另外去黏连那个设门它也在单细胞群里,如果是仪器偶发干扰信号的话那其他样本都没事,是不是也不好解释呢?巨噬细胞的话,因为我专门圈免疫细胞的门就是圈大的,分析的就是巨噬细胞,另外,我看这群细胞是F480和CD3阴性的,倪老师您看还有其他可能吗?
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