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[淋巴细胞亚群] Treg(CD4+CD25+CD127)FMO圈门问题

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发表于 2019-12-25 22:36:41 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
本帖最后由 lalasa 于 2019-12-25 22:36 编辑


                               
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备注:最后一张图是外周血标本.
配色方案:CD4_FITC;CD25_PE;CD127_BV421;Tim-3_APC-Cy7


我有两个问题请教倪老师:
1.是应该根据CD127的FMO画线,还是CD127单标画线呢?二者差别很大,我个人认为CD127的单染分群还是比较明显的,为什么会出现这种差异呢?
2.最后一张图是外周血样品,想看Treg数量的话,是不是自己圈的门比十字门合理呢?(但是我用组织标本做实验后,分群不像外周血这么明显,是不是应该用十字门更合理呢?)

屏幕快照 2019-12-25 下午10.11.19.png
屏幕快照 2019-12-25 下午10.11.45.png
屏幕快照 2019-12-25 下午10.15.02.png

CD4单标

CD4单标
屏幕快照 2019-12-25 下午10.22.22.png
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发表于 2019-12-26 10:15:03 | 显示全部楼层
按照分群画,你画的是对的。因为CD127圈的不是阴性区域,而是包括阴性和Low部分,所以需要根据分群。
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 楼主| 发表于 2019-12-26 19:55:38 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-12-26 10:15
按照分群画,你画的是对的。因为CD127圈的不是阴性区域,而是包括阴性和Low部分,所以需要根据分群。 ...


感谢倪老师,麻烦您帮我看一下,CD127单染管和FMO,如果想画线应该根据哪个图来画呢? 这两条线差别很大。(CD127的FMO显示的是CD4+门里的)
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 楼主| 发表于 2019-12-26 20:52:44 | 显示全部楼层
本帖最后由 lalasa 于 2019-12-26 21:06 编辑

倪老师,我还有一个问题想请教您,我自己分析流式数据时,发现我们学校流式老师给画的CD25的十字门和我自己画的不一样,老师画的门(跟CD25的FMO也不完全相符)在经过坐标轴双指数变化之后位置明显不合适了,为什么会出现这种情况呢,这条线到底怎么画才是对的呢?
屏幕快照 2019-12-26 下午8.47.33.png
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发表于 2019-12-29 10:55:51 | 显示全部楼层
lalasa 发表于 2019-12-26 20:52
倪老师,我还有一个问题想请教您,我自己分析流式数据时,发现我们学校流式老师给画的CD25的十字门和我自己 ...

不能用十字门,你顶楼帖中的不规则门是对的。
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 楼主| 发表于 2019-12-30 11:24:06 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-12-29 10:55
不能用十字门,你顶楼帖中的不规则门是对的。

谢谢倪老师的无私帮助!
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