四色补偿

guo919370840

请教老师：我用的是BD caliber 做的四色实验，FTIC  PE   APC   PerCP   。 当用APC管单染上样做补偿时，结果一直是阴性（已验证，连接APC的抗体是阳性的）。请问这是什么原因呢？想不明白啊。理论上是阳性才对啊

niwanmao

你把Gate去掉，显示所有的信号看看。

CD73也不是所有的B和T细胞都表达的，所以是有可能出现这种情况的。但从这些图来看，感觉还是因为第一个门设门没圈中准确的淋巴细胞原因。

guo919370840

niwanmao 发表于 2020-3-24 14:45
你把Gate去掉，显示所有的信号看看。

CD73也不是所有的B和T细胞都表达的，所以是有可能出现这种情况的。但 ...

老师  我题目中可能没写清楚，我测得是MSC细胞  ，门内的细胞应该都是MSC细胞，我用的双色FITC  PE  同样测得这部分细胞，测得CD73 达到95%以上了。  老师，可能是激光的问题吗？因为APC  是633的激光   

niwanmao

guo919370840 发表于 2020-3-24 18:05
老师  我题目中可能没写清楚，我测得是MSC细胞  ，门内的细胞应该都是MSC细胞，我用的双色FITC  PE  同样 ...

我不知道你这里R1门内细胞比例占多少，从你这里看，感觉这个门是随意放置的，这样的图拿出去，谁都不信是正确的圈门。
其次，你所说的双色FITC、PE，是指什么标记搭配？

总之，你这里的数据，一个是设门不明，我知道你认为自己培养的是MSC，但是设门还是需要有依据的；其次，激光的问题不要首先怀疑，而是要首先从自己的分析上找问题，例如你如果做了4色，那么至少要做一管FMO对照用于设门。

guo919370840

niwanmao 发表于 2020-3-24 20:38
我不知道你这里R1门内细胞比例占多少，从你这里看，感觉这个门是随意放置的，这样的图拿出去，谁都不信是 ...

好的  谢谢 老师