Nestin抗体流式检测问题咨询

chengxi

  用BD的流式抗体，货号561230，测人的神经干细胞的表达，用的破膜剂是BD的554714，但是染NK，MSC，PBMC，全部都是阳性，如下图，是这些细胞全部表达这个抗体吗？还是我的操作失误？

niwanmao

Nestin是一种VI类中间丝蛋白，在中枢神经系统(CNS)的干细胞中表达，但在成熟的CNS细胞中不表达。
Nestin的表达在神经系统发育和体外培养细胞中被广泛用作中枢神经系统干细胞的标志物。它的瞬时表达是神经分化途径中的关键步骤。
Nestin在非神经干细胞群体中也有表达，如胰岛祖细胞和造血祖细胞。
（译自https://www.rndsystems.com/cn/pr ... body-307501_ic2736p）

所以说，上述的结果应该是存在问题的，说明同型对照无法反映真实的荧光背景，建议先行进行Fc阻断试试。其次，破膜的效果需要验证一下，我担心破膜没破进去，你可以用外周血粒细胞染MPO验证破膜效果。

chengxi

niwanmao 发表于 2021-1-14 14:41
Nestin是一种VI类中间丝蛋白，在中枢神经系统(CNS)的干细胞中表达，但在成熟的CNS细胞中不表达。
Nestin的 ...

好的，感谢倪老师