流式相关基础问题

xyf许燕芬

刚开始做流式，按厂家推荐的抗体用量分群不很明显，想做下抗体滴定，想问下染色的时候是共染的，做抗体滴定的时候是按每个染料设置浓度梯度单染进行抗体滴定还是可以共染进行滴定？还有怎么看FCR 封闭的效果，厂家推荐的封闭剂用量是1ug/10e6cells，那么染10e7cells要增加用量吗？还有补偿、FMO对照或者同型对照是每次实验都要设置的吗，还是说建立好模板每次直接用？麻烦各位大神解答了

niwanmao

1、滴定建议单染。
2、封闭的话，建议按照抗体类似的原则，细胞量增加10倍，封闭/抗体用量增加2~3倍。
3、同一批样本，同样的试剂，补偿、FMO对照通用。