凋亡检测，YO-PRO-1/PI染色，结果如下，请大家帮忙看看，谢谢

zxt2009

各位老师、站友，
小弟昨日用肾脏足细胞系进行了凋亡检测，结果如下，放了图片和原始文件，机器是BDFACSVerse，用FITC通道和PI通道，希望各位老师、站友能不吝指点。
同时还有3个疑惑，希望大家帮忙指点一下，
1. 单染管我用的造模浓度比较大一些，可以在YO/PI点散图看到细胞明显的分群，以YO单染为例，第一群细胞在荧光值约10^2-10^3附近，第二群细胞在荧光值10^4附近。我能否理解为第一群是阴性细胞，第二群是阳性细胞？（PI同理）但是这个和论坛中很多老师、站友发的单染图不一样，感觉大家的阴性细胞群荧光值在10^0-10^2之间呢，是因为我的荧光电压比较高吗 （FITC通道电压304和PI通道356都是）

2. 关于调补偿，用Biex值显示就是“横平竖直”，如果用log显示就稍微看着差些，机器默认是Biex，请问各位老师这个有什么不同吗？

3. 空白组、单染组上样后，在阴性对照（双染）上样后，是需要重新调节FITC通道和PI通道的荧光电压吗？是不是必须让阴性细胞群通过调节荧光电压压到10^0-10^2数值附近（我图中阴性对照这样可以么？）

niwanmao

1、你的理解没错，一个阳，一个阴，其它人不同的机器、不同的电压，坐标不一致，不能参考坐标值。
2、biex首先推荐。
3、电压不建议调节，阴性细胞位置，只是建议尽量左下角，是否10^2以内，不做硬性要求，尽量偏左下，是为了强表达的细胞不会跑出坐标范围。

总体来看，你这里的实验挺好的。