抗体滴定如何确定最佳浓度的问题

xwd · 发表于 2021-10-29 17:36:34

请教一个关于抗体滴定的问题，在做CD3抗体滴定，计算染色指数SI时，SI随着抗体浓度增加而增加，且细胞分群很明显，这时候如何确定最佳抗体浓度？

niwanmao · 发表于 2021-10-29 19:55:58

1、SI的计算是否正确。阳性峰median-阴性峰median，再除以阴性峰SD的2倍。
2、如果一直增高，说明高点仍未找到，需增加高点。

xwd · 发表于 2021-11-1 08:59:07

计算公式正确。考虑到目前最高抗体体积为40微升，是推荐体积的2倍，并且细胞分群很明显，若再往上增高，抗体用量有点高，有点浪费。现在比较纠结

xwd · 发表于 2021-11-1 08:59:39

niwanmao 发表于 2021-10-29 19:55
1、SI的计算是否正确。阳性峰median-阴性峰median，再除以阴性峰SD的2倍。
2、如果一直增高，说明高点仍未 ...

计算公式正确。考虑到目前最高抗体体积为40微升，是推荐体积的2倍，并且细胞分群很明显，若再往上增高，抗体用量有点高，有点浪费。现在比较纠结

niwanmao · 发表于 2021-11-1 15:52:54

xwd 发表于 2021-11-1 08:59
计算公式正确。考虑到目前最高抗体体积为40微升，是推荐体积的2倍，并且细胞分群很明显，若再往上增高， ...

图能否看一下？不知道你选择的靶细胞是否合适。

11111 · 发表于 2021-11-5 16:06:30

可以选一个阳性群分群还不错，百分比也差不多的较低的滴度。保证准确又降成本，还可以降低对别通道的影响

喃呢 · 发表于 2021-11-7 09:13:56

我也遇到这个问题，你在区分阴性和阳性的时候画门固定了吗？我把所有样品都用阴性对照去画门，然后就能做出来

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[标本处理] 抗体滴定如何确定最佳浓度的问题