胞内因子刺激实验组细胞群位置上移？

cnynjn2007

各位老师好，我最近在做PBMC样本的胞内因子刺激实验，同一个样本设置了阴性对照，阳性对照（PHA）和实验组（抗原肽库），刺激以后分别检测CD4+T细胞和CD8+T细胞上的IFN-G,IL-2和TNF-alpha。结果却发现实验组的细胞群位置相对阴性对照和阳性对照上移了，不清楚这是什么原因引起的，请各位老师帮忙看下，多谢啦！

                               
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cnynjn2007

图在这里

niwanmao

cnynjn2007 发表于 2022-3-9 23:52
图在这里

FSC/SSC三组之间有差异吗？

cnynjn2007

niwanmao 发表于 2022-3-10 07:55
FSC/SSC三组之间有差异吗？

看起来没有太大差异，您看下图

cnynjn2007

cnynjn2007 发表于 2022-3-10 10:51
看起来没有太大差异，您看下图

不好意思，图在这里

niwanmao

cnynjn2007 发表于 2022-3-10 10:54
不好意思，图在这里

这样看起来，可能还是刺激的多肽的影响。
那么，你的阴性对照，得想办法改成同样用多肽刺激的样本，只是染色时，IFN和TNF通道留空不加抗体。

cnynjn2007

niwanmao 发表于 2022-3-10 14:23
这样看起来，可能还是刺激的多肽的影响。
那么，你的阴性对照，得想办法改成同样用多肽刺激的样本，只是 ...

好的，按照您说的方法，我再试一下，多谢倪老师指点！