提取结肠的巨噬细胞，死细胞很多怎么办？

liushitainan

请问老师，提取结肠固有层巨噬细胞的时候，我的方法是用胶原酶消化后过筛，离心洗一遍后就染色，但是染死活（表面标记）的时候，死细胞太多了，有什么办法可以改善这个问题呢？当时是没有用percoll富集的，因为有人说用percoll巨噬细胞比例会减少。

niwanmao

PerColl适合提到单个核，主要是淋巴细胞。巨噬细胞偏大，不适合。

不知道你针对的物种是哪个？我们站内有本手册，可按组织类型找一下配方，将消化时间缩短，配合机械法，可提高活力：
最完整的实体组织酶消化指导手册
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5834-1-1.html
(出处: 流式中文网)

liushitainan

niwanmao 发表于 2022-4-2 07:58
PerColl适合提到单个核，主要是淋巴细胞。巨噬细胞偏大，不适合。

不知道你针对的物种是哪个？我们站内有 ...

好的，谢谢老师，那老师能否帮忙看一下上面的图，CD45阴性Q11-2那个本来应该是没有染CD45的，但是却在那个门那里是因为串色吗？这个门应该怎么划呢？