脑组织小胶质细胞染不上F4/80抗体

24fpsummer

我是做脑组织造模后检测外周免疫浸润及小胶质细胞，要用F4/80检测外周的巨噬细胞浸润。根据很多文献参考，会有大量的巨噬细胞浸润，然而我的流式结果其他免疫细胞都有阳性信号，只有F4/80测不出来。怀疑过是是没有取到，但是小胶质细胞也是巨噬细胞的一种，在CD11b+CD45int标记的小胶质细胞中也检测不到F4/80的阳性信号。
同时取小鼠脾脏做对照实验，脾脏能够染出F4/80阳性信号，所以排除了抗体原因和仪器原因。不知道自己是哪一步出了问题，非常奇怪，希望各位大佬不吝赐教，感激涕零！


脑组织空白对照（未染抗体）：FITC为CD45,PE-CY7为CD11b，BV421为F4/80


脑组织实验组：FITC为CD45,PE-CY7为CD11b，BV421为F4/80（1比200）


补充：同一次上机，脾脏样品情况：
脾脏组织空白对照（未染抗体）：FITC为CD45,PE-CY7为CD11b，BV421为F4/80
(主要是去粘连)




脾脏组织实验组：FITC为CD45,PE-CY7为CD11b，BV421为F4/80（1比200）

（主要去粘连）

niwanmao

24fpsummer 发表于 2023-7-13 17:17
已补充脾脏样品结果，麻烦老师看一下~

1、上传图片，请务必用高级模式编辑器的工具栏上的上传图片按钮，不要直接拖放。
2、从目前的结果看，感觉脾脏效果也不好。

24fpsummer

dd有没有懂的

24fpsummer

niwanmao 发表于 2023-7-13 10:30
小鼠脾脏的样本结果图形如何？

已补充脾脏样品结果，麻烦老师看一下~

niwanmao

小鼠脾脏的样本结果图形如何？

24fpsummer

有没有懂的小伙伴